Analyse de la Structure du peptidoglycane

le peptidoglycane (également appelé muréine), un composant essentiel et spécifique de l’enveloppe cellulaire bactérienne, forme une couche en forme de maille à l’extérieur de la membrane cytoplasmique, est responsable de la rigidité et de la forme des cellules bactériennes et les protège contre la perturbation osmotique. En effet, toute inhibition de sa biosynthèse (mutation, antibiotique) ou de sa dégradation spécifique (par exemple par le lysozyme) au cours de la croissance cellulaire entraînera une lyse cellulaire., Le peptidoglycane contribue également au maintien d’une forme cellulaire définie et sert d’échafaudage pour ancrer d’autres composants de l’enveloppe cellulaire tels que les protéines et les acides teichoïques. Il est intimement impliqué dans les processus de croissance cellulaire et de division cellulaire. C’est un polymère qui se trouve dans les parois cellulaires des bactéries Gram-positives et Gram-négatives, mais n’a pas été trouvé dans les archées. Chez les bactéries à Gram positif, il représente environ 30 à 70% de la paroi cellulaire en dehors des polysaccharides, des acides teichoïques ou teichuroniques., Ce n’est qu’un composant mineur dans les parois cellulaires à Gram négatif qui se composent principalement de lipopolysaccharides et de lipoprotéines. L’étude de la structure des peptidoglycanes joue un rôle essentiel dans la compréhension des réponses immunitaires, de l’action des antibiotiques et des mécanismes de résistance, de la sensibilité des phages et du comportement sérologique, ainsi que dans la classification et l’identification des bactéries.

le peptidoglycane est un hétéropolymère constitué de brins de glycane réticulés par des peptides., L’épine dorsale du glycane est composée d’unités alternées de N-acétylglucosamine et d’acide N-acétylmuramique liées par des liaisons β-1,4-glycosidiques. Les sous-unités peptidiques contiennent généralement quatre acides aminés L et D alternés, et ils sont connectés aux peuplements glycaniques via les groupes lactyle des résidus d’acide n-acétylmuramique. La réticulation des brins de glycane se produit généralement entre le groupe carboxyle de D-Ala en position 4 et le groupe amino de l’acide diamino en position 3, soit directement, soit à travers un court pont peptidique.

Figure 1., Représentation schématique de la structure du réseau de peptidoglycanes

le peptidoglycane a une structure tridimensionnelle réticulée; par conséquent, il s’agit typiquement d’un polymère insoluble. L’analyse structurelle du peptidoglycane implique généralement des hydrolysations en acides aminés, peptides et sucres aminés ou une digestion enzymatique des brins de glycane en muropeptides afin d’obtenir des informations structurelles à partir de ses constituants. Selon la complexité de la structure du peptidoglycane, un large éventail de techniques analytiques (par exemple TLC, 2D-TLC, GC, MS) doivent être appliquées., L’hydrolyse totale suivie de 2D-TLC ou GC/MS peut être utilisée pour détecter la composition en acides aminés du peptidoglycane qualitativement ou quantitativement. Les énantiomères d’acides aminés peuvent être analysés par chromatographie en phase gazeuse à l’aide d’une colonne chirale. Le N-terminus de l’interpeptide par dinitrophénylation peut également être déterminé par TCL. Dans certains cas, l’hydrolyse partielle suivie de 2D-TLC peut être utilisée pour analyser les peptides courts résultants. Avec des experts compétents et des années d’expérience, Creative Proteomics offre une analyse de structure précise et fiable pour les peptidoglycanes.,

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