Sidst Opdateret den 4 februar 2021 ved Sagar Aryal
Indførelse af Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar (MSA) er brugt som en selektiv og differentieret medium til isolering og identifikation af Staphylococcus aureus fra kliniske og non-kliniske prøver., Det anbefales til påvisning og tælling af koagulasepositive stafylokokker i mælk, mad og andre prøver og tilskynder til vækst af en gruppe af visse bakterier, mens de hæmmer andres vækst.
Princip af Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar indeholder oksekød ekstrakt og proteose pepton, hvilket gør det meget nærende, da de giver væsentlige vækstfaktorer og spore næringsstoffer som kvælstof, vitaminer, mineraler og aminosyrer er afgørende for vækst. Mediet indeholder 7.,5% koncentration af natriumchlorid, hvilket resulterer i delvis eller fuldstændig hæmning af andre bakterieorganismer end stafylokokker. Mannitol er den fermenterbare kulhydratkilde, hvis fermentering fører til syreproduktion. Staphylococcus aureus vokser på dette medium og fermenterer mannitol for at producere gule kolonier. De fleste koagulase negative arter af stafylokokker og Mikrokokker gærer ikke mannitol og vokser som små røde kolonier. Farven på kolonierne og mediet skyldes reaktiviteten af phenolrød (indikator) til mediumets pH. Phenol rød er rød ved pH 8.,4 og phenol rød er gul ved pH 6,8. Agar er størkningsmidlet. Derudover kan 5% v/v Æggeblommeemulsion tilsættes til et medium, der muliggør påvisning af lipaseaktivitet af stafylokokker sammen med mannitolfermentering. Saltet rydder æggeblommeemulsionen, og lipaseproduktionen detekteres som gul uigennemsigtig zoneone omkring kolonierne.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
Ingredients | Gms/Litre |
Proteose peptone | 10.0 |
Sodium chloride | 75.0 |
D- mannitol | 10.,0 |
Beef extract | 1.0 |
Phenol red | 0.025 |
Agar | 15.0 |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.
Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)
- Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
- Boil to dissolve the medium completely.,
- sterilisere ved autoklavering ved 15 lbs. tryk (121.C) i 15 minutter.
- om ønsket kan steril Æggeblommeemulsion (E7899) tilsættes til en endelig koncentration på 5% v/v efter autoklavering.
- hæld afkølet Mannitol Salt Agar i sterile petriskåle og lad afkøle til stuetemperatur.,w zone
Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)
- It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
- det bruges også til tælling af stafylokokker i fødevarer og mejeriprodukter.
- dette medium er også inkluderet i bakteriologisk analytisk Manual for kosmetik test.
- det bruges også til bakteriologisk undersøgelse af S .immingpoolvand, kurbade og drikkevand ved hjælp af membranfiltrering.
Begrænsninger af Mannitol Salt Agar (MSA)
- Flere Staphylococcus andre arter end aureus er mannitol positive og producere gule kolonier, omgivet af gule zoner på dette medie (fx S., capitis, S. capylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans og andre arter). Derfor er yderligere biokemiske test nødvendige for identifikation af S. aureus eller andre arter.
- de fleste andre organismer end stafylokokker hæmmes af den høje saltkoncentration, der findes i Mannitolsaltagar, bortset fra nogle halofilliske marine organismer.
- nogle få stammer af Staphylococcus aureus kan udvise en forsinket gæring af mannitol. Negative plader skal re-inkuberes natten over før kassering.
- Presumptive Staphylococcus aureus skal bekræftes med en koagulase test.,