Oppimisen Tavoitteet
- Tunnistaa ja kuvata kulttuuri media kasvun bakteereja, mukaan lukien esimerkkejä monikäyttöinen media, rikastettu, valikoiva, ero, määritelty, ja rikastamiseen media
tutkimuksen mikro-organismien, helpottaa suuresti, jos voimme kulttuuria heille, että on, pitää lisääntyvien väestön elossa laboratorio-olosuhteissa., Viljellään monia mikro-organismeja, on haastavaa, koska erittäin erityisiä ravinto-ja ympäristövaatimukset ja monimuotoisuus nämä vaatimukset eri lajeja.
Ravitsemukselliset Vaatimukset
käytettävissä olevien media kasvaa bakteereja on huomattava. Jotkut tiedotusvälineet pidetään yleensä monikäyttöinen media ja tukea kasvua monenlaisia organismeja. Ensisijainen esimerkki yleiskäyttöisestä väliaineesta on tryptinen soijaliemi (TSB). Bakteerien tunnistamisessa käytetään erikoisvälineitä, joita täydennetään väriaineilla, pH-indikaattoreilla tai antibiooteilla., Yksi tyyppi, rikastettu media, sisältää kasvutekijöitä, vitamiineja ja muita tärkeitä ravintoaineita edistää kasvua nirso eliöitä, organismeja, jotka eivät voi tehdä tiettyjä ravintoaineita ja vaativat niitä lisätään keskipitkän. Kun väliaineen täydellinen kemiallinen koostumus tunnetaan, sitä kutsutaan kemiallisesti määritellyksi väliaineeksi. Esimerkiksi EZ-väliaineessa kaikki yksittäiset kemialliset komponentit tunnistetaan ja kunkin tarkka määrä tiedetään. Monimutkaisissa väliaineissa, jotka sisältävät hiivan, lihan tai kasvien uutteita ja digestejä, väliaineen tarkkaa kemiallista koostumusta ei tunneta., Yksittäisten osien määrät ovat määrittelemättömiä ja vaihtelevia. Ravinneliemi, tryptinen soijaliemi ja aivosydäninfuusio ovat kaikki esimerkkejä monimutkaisesta mediasta.
Kuva 1. Tämän MacConkey agar levy, laktoosi-fermenter E. coli-pesäkkeet ovat kirkkaan vaaleanpunainen. Serratia marcescens, joka ei käydä laktoosi, muotoja kerma-värillinen raita tan medium., (luotto: American Society for Microbiology)
Media, joka estää kasvun toivottuja mikro-organismeja ja tukea kasvua organismin edun toimittamalla ravinteita ja vähentää kilpailua kutsutaan selektiivinen media. Esimerkki selektiivisestä väliaineesta on MacConkey agar. Se sisältää sappi suolat ja crystal violet, jotka häiritsevät kasvu monet gram-positiivisia bakteereja, ja suosion kasvu gram-negatiivisten bakteerien, erityisesti Enterobakteerien. Näitä lajeja kutsutaan yleisesti enteriikoiksi, ne asuvat suolistossa ja ovat sopeutuneet sappisuolojen läsnäoloon., Rikastuminen kulttuurien edistää etuuskohteluun kasvua haluttuun mikro-organismi, joka edustaa murto-organismien läsnä inokulaatti. Esimerkiksi, jos haluamme eristää bakteereja, jotka hajoavat raakaöljyn, hydrocarbonoclastic bakteerit, juokseva subculturing välineellä, joka toimittaa hiiltä vain muodossa raakaöljyn rikastuttaa kulttuureja öljyä syöviä bakteereja. Differentiaalimedian avulla eri bakteerien pesäkkeet on helppo erottaa toisistaan siirtomaiden värin tai väliaineen värin muutoksella., Väri muutokset ovat seurausta end tuotteita luoma vuorovaikutus bakteerien entsyymien kanssa differentiaali-substraattien keskipitkällä tai, kun kyseessä on hemolyyttinen reaktiot, hajoaminen punasoluja keskipitkällä. Kuvassa 1 laktoosin differentiaalikäyminen voidaan havaita MacConkey agarilla. Laktoosifermenterit tuottavat happoa, joka kääntää väliaineen ja vahvojen fermentoijien pesäkkeet kuumaksi vaaleanpunaiseksi. Väliainetta täydennetään pH-indikaattorilla neutraali punainen, joka muuttuu alhaisessa pH: ssa kuumaksi vaaleanpunaiseksi., Selektiiviset ja differentiaaliset väliaineet voidaan yhdistää ja niillä on tärkeä rooli bakteerien tunnistamisessa biokemiallisin menetelmin.
Miettiä
- Erottaa monimutkainen ja kemiallisesti määritellyt media.
- Erottaa valikoiva ja rikastettuun.
End-of-Vuoden Piknik
mikrobiologian osasto juhlii lopussa koulun vuonna Toukokuussa pitämällä sen perinteinen piknik vihreä., Puheet venyvät pariksi tunniksi, mutta lopulta kaikki tiedekunnat ja opiskelijat voivat kaivautua ruokaan: kanasalaatti, tomaatit, sipulit, salaatti ja vaniljakastikepiirakka. Illalla, koko osasto, lukuun ottamatta kahta kasvissyöjä opiskelijat, jotka eivät syö kanasalaattia, on kärsineiden kanssa pahoinvointi, oksentelu, röyhtäily ja vatsan kouristelua. Useat ihmiset valittavat ripulista. Yhdellä potilaalla on sokin merkkejä (matala verenpaine). Potilailta kerätään veri-ja ulostenäytteitä, ja kaikki aterialla tarjottavat ruoat analysoidaan.,
Bakteerit voivat aiheuttaa suolistotulehdus (tulehdus mahassa ja suolistossa) joko asettumaan ja jäljittelevän itse isäntä, joka pidetään infektio, tai erittämällä myrkkyjä, jotka pidetään myrkytyksen. Infektioiden merkit ja oireet tyypillisesti viivästyvät, kun taas päihtymys ilmenee muutamassa tunnissa, kuten piknikin jälkeen tapahtui.
potilaiden verinäytteistä ei löytynyt merkkejä bakteeri-infektiosta, mikä viittaa siihen, että kyseessä oli myrkytystapaus., Koska päihtymys johtuu eritetyistä toksiineista, bakteereja ei yleensä havaita veri-tai ulostenäytteissä. MacConkey agar ja sorbitolia-MacConkey agar levyt ja ksyloosi-lysiini-deoksikolaatin (XLD) levyt oli ympätty jakkara näytteet ja ei ilmennyt epätavallisen värillisiä pesäkkeitä, ja ei musta siirtomaita tai valkoisia pesäkkeitä havaittiin XLD. Kaikki laktoosifermenterit MacConkey agarilla myös ferment sorbitolia. Nämä tulokset sulkivat pois elintarvikkeiden välityksellä tarttuvien sairauksien yleiset tekijät: E. coli, Salmonella spp., ja Shigella spp.
Kuva 2., Grampositiivinen cocci klustereissa. (luotto: Centers for Disease Control and Prevention)
Analyysi kanasalaatti kävi ilmi, epänormaali määrä gram-positiivisia kokkeja järjestetty klustereita (Kuva 2). Grampositiivisen coccin kulttuuri vapauttaa kuplia, kun se sekoitetaan vetyperoksidin kanssa. Kulttuuri muuttui mannitolisuola-agarin keltaiseksi 24 tunnin haudonnan jälkeen.
kaikki testit viittaavat Staphylococcus aureukseen toksiinia erittävänä organismina. Salaatista otetuissa näytteissä näkyi grampositiivisten cocci-bakteerien esiintyminen ryppäissä. Siirtokunnat olivat positiivisia katalaasille., Bakteeri kasvoi mannitolisuola-agarilla, joka fermentoi mannitolia, mikä näkyy väliaineen muuttumisena keltaiseksi. PH-indikaattori mannitoli suolaa agar fenoli on punainen, joka muuttuu keltaiseksi, kun väliaine on hapatettu tuotteet käyminen.
S. aureuksen erittämän toksiinin tiedetään aiheuttavan vaikeaa gastroenteriittiä. Eliö kulkeutui salaattiin todennäköisesti ruoanvalmistuksen yhteydessä ja moninkertaistui, kun salaattia pidettiin puheenvuorojen aikana lämpimässä huoneenlämmössä.,
- Mitkä ovat joitakin muita tekijöitä, jotka saattavat osaltaan nopean kasvun S. aureus kanasalaatti?
- miksi S. aureusta ei estäisi suolan esiintyminen kanasalaatissa?
Keskeisiä Käsitteitä ja Yhteenveto
- Kemiallisesti määritellyt media sisältää vain kemiallisesti tunnettu osia.
- selektiiviset mediat suosivat joidenkin mikro-organismien kasvua estäen samalla toisia.,
- Rikastettu media sisältää lisättyä välttämättömiä ravintoaineita tietyn organismin tarvitsee kasvaa
- Ero media auttaa erottamaan bakteerien väri siirtomaita tai muuttaa keskipitkällä.
Multiple Choice
EMB agar on taudinaiheuttajien tunnistamisessa ja eristämisessä käytettävä väliaine. Se sisältää pilkottuja lihaproteiineja orgaanisten ravintoaineiden lähteenä. Kaksi-indikaattori väriaineita, eosiini ja metyleenin sininen, estää kasvun gram-positiivisia bakteereja, ja erottaa laktoosia fermentoivat ja nonlactose käymisen organismeja., Laktoosifermenterit muodostavat metallinvihreitä tai syvän violetteja pesäkkeitä, kun taas epälaktoosifermenterit muodostavat täysin värittömiä pesäkkeitä. EMB agar on esimerkki mistä seuraavista?
- valikoiva keskipitkän vain
- ero keskipitkän vain
- valikoiva keskipitkän ja kemiallisesti määritellyt keskipitkän
- valikoiva medium, ero keskisuurten, ja monimutkainen keskipitkän
Haemophilus influenzae on kasvanut suklaa-agar, joka on veri-agar käsitelty lämpöä vapautuu kasvutekijöitä keskipitkällä. H. influenzae on kuvattu nimellä________.
- on acidophile
- a termofiili
- velvoittanut anaerobi
- nirso
Täytä Tyhjä
Veri-agar sisältää monia määrittelemätön ravinteita, tukee kasvua suuri määrä bakteereja, ja mahdollistaa eriyttämisen bakteereja, mukaan hemolyysi (erittely verta). Keskipitkän on ________ ja ________.
Rogosa agar sisältää hiivauutetta. PH on säädetty 5,2: een ja estää monien mikro-organismien kasvun; kuitenkin kaikki pesäkkeet näyttävät samanlaisilta. Keskipitkän on ________ ja ________.
Miettiä
Mikä on suurin ero rikastamiseen kulttuuri ja valikoiva kulttuuri?
Kriittinen Ajattelu
Haemophilus, influenzae kasvaa parhaiten 35-37 °C ~5% CO2 (tai kynttilä-purkki) ja vaatii hemin (X factor) ja nikotiiniamidi-adeniini-dinucleotide (NAD, joka tunnetaan myös nimellä V-tekijä) kasvua. Käytä tässä luvussa opittua sanastoa kuvaile H. influenzae.
- Centers for Disease Control and Prevention, Maailman terveysjärjestö., ”CDC: n laboratoriomenetelmät Neisseria meningitidis -, Streptococcus pneumoniae-ja Haemophilus-influenssan aiheuttaman aivokalvontulehduksen diagnosoimiseksi. WHO: n Käsikirja, 2.painos.” 2011. http://www.cdc.gov/meningitis/lab-manual/full-manual.pdf ok