gélose au sel de Mannitol (MSA)

dernière mise à jour le 4 février 2021 par Sagar Aryal

Introduction de la gélose au sel de Mannitol (MSA)

La gélose au sel de mannitol (MSA) est utilisée comme milieu sélectif et différentiel pour l’isolement et l’identification de Staphylococcus aureus à partir d’échantillons cliniques et non cliniques., Il est recommandé pour la détection et le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive dans le lait, les aliments et d’autres spécimens et encourage la croissance d’un groupe de certaines bactéries tout en inhibant la croissance des autres.

principe de la gélose au sel de Mannitol (MSA)

La gélose au sel de Mannitol contient de l’extrait de bœuf et de la protéose peptone, ce qui la rend très nutritive car elle fournit des facteurs de croissance essentiels et des oligo-éléments nutritifs Le support contient 7.,Concentration de 5% de chlorure de sodium qui entraîne l’inhibition partielle ou complète d’organismes bactériens autres que les staphylocoques. Le Mannitol est la source de glucides fermentescibles, dont la fermentation conduit à la production d’acide. Staphylococcus aureus pousse sur ce milieu et fermente le mannitol pour produire des colonies jaunes. La plupart des espèces de staphylocoques et de microcoques à coagulase négative ne fermentent pas le mannitol et se développent sous forme de petites colonies rouges. La couleur des colonies et du milieu est due à la réactivité du rouge phénol (indicateur) au pH du milieu. Le phénol rouge est Rouge à pH 8.,4 et le phénol rouge est jaune à pH 6,8. La gélose est l’agent solidifiant. En outre, une émulsion de jaune d’oeuf à 5% v/v peut être ajoutée à un milieu qui permet la détection de l’activité lipase des staphylocoques avec la fermentation du mannitol. Le sel efface l’émulsion de jaune d’oeuf et la production de lipase est détectée comme une zone opaque jaune autour des colonies.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.

Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)

1. Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
2. Boil to dissolve the medium completely.,
3. stériliser par autoclavage à 15 lb. pression (121°C) pendant 15 minutes.
4. si désiré, une émulsion stérile de jaune d’oeuf (E7899) peut être ajoutée à une concentration finale de 5% v/v après autoclavage.
5. verser la gélose au sel de Mannitol refroidie dans des boîtes de Pétri stériles et laisser refroidir à température ambiante.,w zone Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth

   Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)

   1. It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
   2. Il est également utilisé pour le dénombrement des staphylocoques dans les aliments et les produits laitiers.
   3. ce milieu est également inclus dans le manuel D’analyse bactériologique pour les tests cosmétiques.
   4. Il est également utilisé dans l’examen bactériologique de l’eau de piscine, des spas et de l’eau potable à l’aide d’une filtration membranaire.

   Limitations de la gélose au sel de Mannitol (MSA)

   1. plusieurs espèces de staphylocoques autres que aureus sont positives au mannitol et produisent des colonies jaunes entourées de zones jaunes sur ce milieu (par exemple S., les espèces de ce genre sont les suivantes: capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans et d’autres espèces). Par conséquent, d’autres tests biochimiques sont nécessaires pour l’identification de S. aureus ou d’autres espèces.
   2. la plupart des organismes autres que les staphylocoques sont inhibés par la forte concentration de sel trouvée dans la gélose au sel de Mannitol, à l’exception de certains organismes marins Halophiles.
   3. quelques souches de Staphylococcus aureus peuvent présenter une fermentation retardée du mannitol. Les plaques négatives doivent être ré-incubées pendant la nuit avant de les jeter.
   4. la présomption de Staphylococcus aureus doit être confirmée par un test de coagulase.,