를 놓치지 않았 Dr.Philip Dubé”s 최근 세미나,가장 중요한 것 마우스 세계에서 가 C57BL/6 마우스? 그의 프리젠 테이션을 탐구 유전적 다양성이 C57BL/6substrains,에 미치는 영향 보석 모델 및 유틸리티의 C57BL/6mouse 연구에서의 대사,면역학,종양학과는 동작입니다.
시간 제약으로 인해 많은 연구자들은 질문을 제출하는 그의 Q&세션에 갔을 받을 수 없습니다., 여기에 우리가 얻을 수있는 모든 질문이 있습니다:
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Q:taconic Biosciences 는 현재 얼마나 많은 다른 C57BL/6 서브 트레인을 제공합니까?
Dr.Philip Dubé(PD):Taconic 은 두 개의 다른 C57BL/6substrains,C57BL/6NTac 및 C57BL/6JBomTac 을 제공합니다.
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Q:C57bl/6NTac 은 잭슨 연구소의 C57BL/6NJ 와 동일합니까?
PD:Taconic”s C57BL/6NTac 은 유 전적으로 유사하지만 C57BL/6NJ 균주와 동일하지 않습니다.
둘 다 한때 국립 보건원(Nih)동물 유전 자원에서 유지 된 C57BL/6N 배아에서 유래되었다., Taconic 은 1991 년에이 변형을 받았고 Jackson Laboratory 는 1997 년에 그들을 받았습니다.
Taconic 유지하는 유전적 안정성의 모든 근친 마우스 균주를 통해 냉동 보존을 보장하는 C57BL/6NTac 이로 원래 C57BL/6N 라인에서 유지 NIH.
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Q:microbiome 프로파일과 관련하여 유전 적 배경이 얼마나 중요합니까?
PD:C57BL/6substrains 사이의 유전 적 변이는 다중 표현형 차이에 기여한다., 그러나,미생물이 있을 수 있다 동등하게 중요한 역할을 결정하는 여러 가지 특성 마우스의 변형 특히,면역 및 대사 기능입니다.
마우스 공급에서 다른 업체에서 또는 다른 위치에서 같은 공급업체,수도는 크게 다른 미생물 프로필에 있습니다. 기능적 영향을 미치는 알려진 상응하는 미생물의 구체적인 예로는 분절 된 선조 박테리아(SFB)및 락토 바실러스 루테 리 1,2 가 있습니다.
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Q:유전 적 표류를 피하기 위해 얼마나 자주 식민지를 백 크로스해야합니까?,
PD:wildtype C57BL/6 마우스의 식민지를 유지하는 경우 일반적으로 적어도 4 세대마다 신선한 주식으로 교체하는 것이 좋습니다. 정의 된 C57BL/6 배경에서 유전자 조작 마우스의 식민지를 사용하는 경우 4~10 세대마다 백 크로싱을 고려하십시오.
한 세대의 backcrossing 은 게놈의 절반 만 대체하기 때문에 더 적은 것이 아니라 더 자주 수행하는 것이 좋습니다.
백 크로싱 할 때 라인의 배경과 동일한 정의 된 근친 주식을 사용하도록주의하십시오., 부적절한 C57BL/6 서브 트레인을 사용하면 향후 studies3,4 에 영향을 줄 수 있습니다.
라인의 유전 적 배경에 대해 확실하지 않은 경우 SNP 테스트를 수행해야합니다(아래 참조). 더 나은 옵션은 cryopreserve 배아(또는 정자)에서 당신의 선고 완전히 그것을 대체 rederived 동물 모니다. 추가 이점을 이안의 백업을 위한 당신의 식민지의 경우에는 예상치 못한 상황(질병,사고로 부당하게 짝지우기,설비 문제,natural disasters,etc.).
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Q:서브 트레인을 검증하기위한 실험적 접근법은 무엇입니까?,
PD:SNP(Single nucleotide polymorphism)패널 테스트는 마우스 균주의 유전 적 배경을 결정하는 간단하고 경제적 인 방법입니다.
Substrain 배경을 쉽게 구별할 수 있를 사용하여 SNP 패널 디자인을 차별화하 C57BL/6 변종,마우스 등 B6SNP Panel 에서 Taconic(ninety-six Snp in total). 이 패널에는 C57BL/6NTac 과 C57BL/6J 서브 트레인이 다른 아흔 네 개의 Snp 가 포함되어 있습니다.,
그러나이 패널은 C57BL/6N 서브 트레인 내의 차이에 덜 민감하며 C57BL/6NJ 를 다른 C57BL/6N 서브 트레인과 차별화하는 두 개의 Snp 만 포함합니다. 사용하기 전에는 대상 C57BL/6SNP panel,당신은 확인해야하는 부담은 순수한 C57BL/6 배경과하지 않는 유전자 오염 기타 종자(예를 들어 129S6/Sv,FVB 또는 BALB/c). 전반적인 변형 조성은보다 포괄적 인 SNP 패널을 사용하여 결정할 수 있습니다.
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Q:다른 c57bl/6substrains 사이의 표현형 차이를 일으키는 유전자(들)를 어떻게 결정할 수 있습니까?,
PD:연결 분석 유전 사이 십자가 다른 C57BL/6substrains 과 함께,배열 및 SNP 전체 게놈 서열을 식별하는 데 도움이 될 수 있습 putative 원인 유전자를 지정한 표현형입니다. 그러나이 접근법은 C57BL/6 서브 트레인 간의 연계 분석을위한 제한된 수의 마커를 감안할 때 도전적입니다.
유전자 변형에 대한 기능적 결과의 확인은 정의 된 유전 적 배경에 대한 표적화 된 유전자 편집을 공식적으로 요구할 것이다., 예를 들어,C57BL/6NHsd 서브 트레인에서의 비정상적인 B 세포 발달은이 manner3 에서 Dock2m1Hsd 변형에 기인했다. 마이크로 바이 옴 영향과 같은 균주 간의 차이에 대한 비 유전 적 요인을 배제하기 위해주의를 기울여야합니다.
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- 가장 중요한 것 마우스 세계에서 가 C57BL/6Mouse
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Q:어떻게 성별 영향 연구 결과에 C57BL/6 쥐?
PD:성별이 큰 영향을 줄 수 있습니다., 명백한 체중과 호르몬 차이를 제외하고,C57BL/6 남성은 C57BL/6 여성에 비해 행동 및 대사 특성이 다릅니다.
성별은 연구 설계에서 항상 고려되어야합니다. 성별은 중요한 생물학적 변수이며,연구에 포함시킬 성별(들)의 선택은 과학적으로 정당해야합니다. 예를 들어,2015 년 현재 NIH 는 생물 의학 연구에서 동물을 포함하는 모든 보조금 신청에서 성별 선택에 대한 정당성을 요구합니다.
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Q:남성 C57BL/6 마우스에서 침략과 싸우는 행동을 어떻게 줄일 수 있습니까?,
PD:C57BL/6 남성은 나이가 들어감에 따라 또는 스트레스가 많은 상황에 처했을 때 점점 공격적으로 변할 수 있습니다. C57BL/6 남성은 계층 적이며 지배적 인 남성은 여러 마리의 마우스가있는 새장에서 발생할 수 있습니다. 어린 나이부터 다른 수컷과 공동 수용 될 때,또는 littermates 로서,침략의 가능성은 최소화됩니다.
다른 생소한 남성과 함께 post-pubertal C57BL/6 남성을 공동 수용하지 않는 것이 좋습니다. 남성 스 터 드 않을 수 있으로 다른 남성과 여러 남성 않을 수 있으로 모든 여성(s).,
스트레스 유발 상황(절차,익숙하지 않은 관리인,질병 등)는 침략의 호감도를 높이는 경향이 있습니다. 제공하는 보충 장치를 줄일 수 있습 공격적인 행동;이러한 중첩 자료,셰퍼드 오두막집,씹어,스틱 튜브,etc.
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Q:C57BL/6 마우스가 궤양 성 피부염을 일으키는 이유는 무엇이며 어떻게 예방 및/또는 치료할 수 있습니까?
PD:모든 C57BL/6 서브 트레인은 피부염을 일으키기 쉽습니다. 유전 적 원인을 알 수는 없지만 이에 대한 강력한 환경 구성 요소가 있습니다.,
30%에서 70%사이의 일정한 온도와 상대 습도로 안정된 환경을 유지함으로써 피부염 발생률을 최소화 할 수 있습니다.
일단 피부염이 나타나면,이것은 역사적으로 치료하기가 어려웠습니다. 그러나,새로운 매우 효과적인 관리 옵션은 클립 후 발톱의 영향을 받는 쥐의 긁힘을 방지하기 위해과 악화의 상태는 동안 그것은 heals1. 국소 용 살브와 항생제는 또한 치유 중 감염을 예방하는 데 도움이 될 수 있지만 일반적으로 단독으로 효과적이지는 않습니다.,
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Q:Purina5015chow 와 같은 육종식이 요법으로 C57BL/6NTac 마우스가 비만 해지고 대사 증후군을 나타내겠습니까?
PD:고 에너지 육종 다이어트는 산후 및 지속적으로 번식하는 암컷을 지원하기 위해 지방이 증가함에 따라 공식화됩니다. 전형적으로,이들은 표준 chows 에 있는 5-6%와 비교된 무게에 의하여 약 11%지방질이 있습니다.
c57bl/6NTac 마우스는 고지방식이를 먹일 때식이 유발 비만과 인슐린 저항성을 개발하기 쉽다. 11%뚱뚱한 규정식에 유지될 때 증가된 adiposity 는 의외이지 않을 것입니다.
Taconic”s 표준 차우는 NIH31M 공식입니다.,
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Q:대사 연구에 사용할 특정 C57BL/6 서브 트레인을 선택하는 간단한 방법이 있습니까?
PD:c57bl/6N 서브 트레인은 종종 대사 연구에 권장됩니다.
대사 연구에서 마우스의 성능은 유전 적 요인뿐만 아니라 고유 한 마이크로 바이 옴 프로파일에 의존 할 것이다. 마우스의 마이크로 바이 옴은 기원 및 축산 프로토콜에 따라 달라질 것입니다.,
최고의 추천을 선택하는 최적의 모델을 기반으로 검증 연구,특정 substrain 에서 공급된 특정 위치에 있습니다.
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Q:c57bl/6 마우스는 스트레스 유발 프로토콜에 대해 얼마나 잘 작동합니까?
PD:일반적으로 C57BL/6 마우스는 다른 균주와 다르게 스트레스에 반응합니다. Substrain 차이가있을 가능성이 있지만,이들은 잘 정의되어 있지 않습니다.
에 대비해 더 많은 스트레스를 발생하기 쉬운 종자와 같은 BALB/c,129S6/Sv,C57BL/6 현재의 더 많은 대사보다 행동 장애에 대응하여 스트레스.,
성별과 일주기 리듬은 사회화 및 기타 환경 적 영향 외에도 중요한 요소 일 가능성이 높습니다. C57bl/6 마우스에 대해 검증 된 만성 스트레스 프로토콜이 게시되었습니다 6.
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Q:C57BL/6 마우스에 이식 된 종양의 성장에 가변성을 유발하는 요인은 무엇입니까?
PD:이식 된 종양의 성장에 영향을 줄 수있는 많은 요인이 있습니다.,
경우에도 동일한 번호의 세포를 이식(그리고 그들은 같은 수준의 생존 능력),의 정확한 위치는 이식하고 후속 관류 수 있는 과감에 미치는 영향을 평가는 종양의 성장이다. 예를 들어,종양 성장률은 더 anteriorly 또는 posteriorly7 이식 여부에 따라 4 인자에 따라 달라질 수 있습니다.
피하 이식편의 정확한 배치는 연구에서 고려되고 통제되어야한다. 연령과 시작중량의 동물에 영향을 미칠 수 있는 종양의 성장 내가 권하고 주문하는 쥐의 체중에 의해 정규화하다., 연구자들은 또한 마이크로 바이 옴 차이로 인한 영향을 최소화하기 위해 단일 위치에서 마우스를 주문해야합니다.
마지막으로,마우스,사회적으로 계층적 및 하위에 있는 사람들이 서로 다른 레벨의 스트레스에 영향을 미칠 수 있는 면역 반응과 종양의 성장이다. 환경 농축,적절한 순응 및 축산 조건(취급,빛,소음 등)특히 남성의 경우 스트레스를 최소화하는 데 도움이 될 수 있습니다.,
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- 가장 중요한 것 마우스 세계에서 가 C57BL/6Mouse
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- 재해에 대비:선택과 요소를 선택할 때 고려해야 할 줄을 Cryopreserve