Sist Oppdatert februar 4, 2021 av Sagar Aryal
Innføringen av Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar (MSA) er brukt som en selektiv og differensiert medium for isolering og identifisering av Staphylococcus aureus fra kliniske og ikke-kliniske prøver., Det er anbefalt for påvisning og telling av coagulase-positive Stafylokokker i melk, mat og andre prøver og stimulerer veksten av en gruppe av visse bakterier mens hemme veksten av andre.
Prinsippet om Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar inneholder storfekjøtt ekstrakt og proteose peptone, noe som gjør det svært næringsrik som de gir viktige vekstfaktorer og spore næringsstoffer som nitrogen, vitaminer, mineraler og aminosyrer viktig for vekst. Mediet inneholder 7.,5% konsentrasjonen av natrium og klorid som resulterer i delvis eller fullstendig hemming av bakterielle organismer annet enn stafylokokker. Mannitol er gjæringsdyktig karbohydrat kilde, gjæring som fører til syre produksjon. Staphylococcus aureus vokser på dette mediet og ferments mannitol å produsere gule kolonier. De fleste coagulase-negative arter av Stafylokokker og Micrococci ikke gjære mannitol og vokser som små røde kolonier. Fargen på koloniene og medium er på grunn av reaktiviteten av phenol red (indikator) til pH i mediet. Phenol red er rød ved pH 8.,4 og phenol red gul ved pH 6.8. Agar er solidifying agent. I tillegg, 5% v/v Eggeplomme Emulsjon kan legges til et medium som muliggjør påvisning av lipase aktivitet av stafylokokker sammen med mannitol gjæring. Salt tømmer eggeplomme emulsjon og lipase produksjon er registrert som gul ugjennomsiktig sone rundt koloniene.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
Ingredients | Gms/Litre |
Proteose peptone | 10.0 |
Sodium chloride | 75.0 |
D- mannitol | 10.,0 |
Beef extract | 1.0 |
Phenol red | 0.025 |
Agar | 15.0 |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.
Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)
- Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
- Boil to dissolve the medium completely.,
- Sterilisere av autoclaving på 15 kg. trykk (121°C) i 15 minutter.
- Dersom det er ønskelig, sterile Eggeplomme Emulsjon (E7899), kan legges til en endelig konsentrasjon på 5% v/v etter autoclaving.
- Hell avkjølt Mannitol Salt Agar i sterilt petri retter og avkjøl til romtemperatur.,w zone
Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)
- It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
- Det er også brukt til opplisting av stafylokokker i mat og meieriprodukter.
- Dette mediet er også inkludert i Bakteriologisk Analytisk Manual for kosmetikk testing.
- Det er også brukt i bakteriologisk undersøkelse av svømmebasseng, vann, spa og drikkevann ved hjelp av membran filtrering.
Begrensninger av Mannitol Salt Agar (MSA)
- Flere Staphylococcus andre arter enn aureus er mannitol positive og produsere gule kolonier omgitt av gule soner på dette mediet (f.eks. S., capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans, og andre arter). Derfor videre biokjemiske tester er nødvendig for identifikasjon av S. aureus eller andre arter.
- de Fleste andre organismer enn stafylokokker er hemmet av den høye salt konsentrasjon finnes i Mannitol Salt Agar bortsett fra noen halophillic marine organismer.
- Et par stammer av Staphylococcus aureus, kan gi en forsinket gjæring av mannitol. Negative platene bør være re-inkubert over natten før de kastes.
- Presumptive Staphylococcus aureus må være bekreftet med en coagulase-test.,