voor het Laatst Bijgewerkt op 4 februari 2021 door Sagar Aryal
Inleiding van Mannitol Zout Agar (MSA)
Mannitol Zout Agar (MSA) wordt gebruikt als een selectieve en gedifferentieerde medium voor de isolatie en identificatie van de bacterie Staphylococcus aureus van klinische en niet-klinische monsters., Het wordt aanbevolen voor de detectie en telling van coagulase-positieve stafylokokken in melk, voedsel en andere specimens en stimuleert de groei van een groep van bepaalde bacteriën terwijl het remmen van de groei van anderen.
principe van Mannitolzout-Agar (MSA)
Mannitolzout-Agar bevat runderextract en proteosepepton, waardoor het zeer voedzaam is omdat ze essentiële groeifactoren en sporenstoffen zoals stikstof, vitaminen, mineralen en aminozuren leveren die essentieel zijn voor de groei. Het medium bevat 7.,5% natriumchloride-concentratie die leidt tot de gedeeltelijke of volledige remming van andere bacteriële organismen dan stafylokokken. Mannitol is de vergistbare koolhydraatbron, waarvan de gisting leidt tot zuurproductie. Staphylococcus aureus groeit op dit medium en fermenteert mannitol om gele kolonies te produceren. De meeste coagulase-negatieve soorten stafylokokken en Microkokken fermenteren mannitol niet en groeien als kleine rode kolonies. De kleur van de kolonies en het medium is te wijten aan de reactiviteit van fenolrood (indicator) aan de pH van het medium. Fenolrood is rood bij pH 8.,4 en fenolrood is geel bij pH 6,8. Agar is het stollende middel. Bovendien kan 5% v / v Eidooieremulsie worden toegevoegd aan een medium dat de detectie van lipase-activiteit van stafylokokken samen met mannitolfermentatie mogelijk maakt. Het zout verwijdert de eidooieremulsie en de lipaseproductie wordt gedetecteerd als gele ondoorzichtige zone rond de kolonies.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
Ingredients | Gms/Litre |
Proteose peptone | 10.0 |
Sodium chloride | 75.0 |
D- mannitol | 10.,0 |
Beef extract | 1.0 |
Phenol red | 0.025 |
Agar | 15.0 |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.
Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)
- Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
- Boil to dissolve the medium completely.,
- steriliseren door autoclaaf bij 15 lbs. druk (121°C) gedurende 15 minuten.
- indien gewenst kan een steriele Eidooieremulsie (E7899) worden toegevoegd aan een eindconcentratie van 5% v/v na het autoclaveren.
- giet gekoelde Mannitolzout agar in steriele petrischalen en laat afkoelen tot kamertemperatuur.,w zone
Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)
- It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
- Het wordt ook gebruikt voor de telling van stafylokokken in levensmiddelen en zuivelproducten.
- dit medium is ook opgenomen in het bacteriologische analytische Handboek voor het testen van cosmetica.
- Het wordt ook gebruikt bij het bacteriologische onderzoek van zwembadwater, spa ‘ s en drinkwater met behulp van membraanfiltratie.
beperkingen van Mannitolzout-Agar (MSA)
- verschillende andere Staphylococcus-soorten dan aureus zijn mannitolpositief en produceren gele kolonies omgeven door gele zones op dit medium (bv. S., capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans, en andere soorten). Daarom zijn verdere biochemische tests nodig voor de identificatie van S. aureus of andere soorten.
- de meeste andere organismen dan stafylokokken worden geremd door de hoge zoutconcentratie die wordt aangetroffen in Mannitolzout-Agar, met uitzondering van enkele halofillische mariene organismen.
- enkele stammen van Staphylococcus aureus kunnen een vertraagde fermentatie van mannitol vertonen. Negatieve platen moeten ‘ s nachts opnieuw worden geïncubeerd voordat ze worden weggegooid.
- vermoedelijke Staphylococcus aureus moet worden bevestigd met een coagulasetest.,