Introdução
Coagulase-negativo estafilococos (CoNS), os membros dos estafilococos grupo, são caracterizados como cocos Gram-positivos, apresentados como células isoladas ou com disposição irregular, e estão imóveis, a não-formação de esporos, catalase-positivos, principalmente os anaeróbios facultativos, e a falta da enzima coagulase.,1 conts são parte do microbiota humano, considerados patógenos oportunistas, causando infecções principalmente em bebês prematuros, e pacientes imunocomprometidos e protéticos.O aumento da resistência antimicrobiana nos últimos anos teve um grande impacto nas infecções hospitalares causadas por contras. A oxacilina é uma penicilina semissintética utilizada no teste de sensibilidade para detecção de resistência à meticilina e tratamento de infecções estafilocócicas. No entanto, foram observadas taxas de 66% a 95% de resistência à oxacilina em isolados clínicos CoNS.,2 A resistência à oxacilina é frequentemente mediada pelo gene mecA, que codifica uma proteína suplementar de ligação à penicilina (PBP2a) com baixa afinidade para as penicilinas semissintéticas.3 O gene mecA está localizado em um elemento genético móvel conhecido como o Staphylococcal Cassette Cromossomo mec (SCCmec) que contém o mec complexo, composto do gene mecA e seu regulador de genes mecI e mecRI, a ccr complexos, responsáveis pela integração e excisão do SCCmec, e J região, o que não é essencial para o SCCmec formação, mas pode levar a não-β–lactam genes de resistência.,Até à data, 13 tipos SCCmec foram descritos, com base na combinação de tipos complexos de genes ccr e classes de complexos de genes mec. Os subtipos foram definidos por polimorfismos da região J na mesma combinação de complexos mec e ccr.5
o aparecimento de isolados resistentes à oxacilina levou à utilização final de antimicrobianos alternativos para o tratamento de infecções contra a con, tais como a vancomicina do glicopeptídeo. Entretanto, descrições de susceptibilidade reduzida e resistência à vancomicina têm sido relatadas nas últimas décadas.,A susceptibilidade reduzida à vancomicina pode estar relacionada com modificações metabólicas, tais como a aceleração na síntese do peptidoglicano, resultando no espessamento Da Parede Celular. Neste processo, a vancomicina não é capaz de inibir a síntese de peptidoglicano, uma vez que está esgotado devido à maior disponibilidade de locais de D-alanil-D-alanina.,7
devido ao aumento das infecções hospitalares causadas por CoNS, este estudo teve como objectivo caracterizar as estirpes resistentes à oxacilina e determinar a susceptibilidade antimicrobiana de uma colheita de CoNS de cultura sanguínea de 20 anos, isolados do Hospital Botucatu das Clínicas inpatients.300 estirpes de CoNS foram isoladas a partir de culturas de sangue de doentes do Hospital das Clínicas – Paulista de Botucatu (UNESP)., Os isolados foram recolhidos entre 1990 e 2009 e mantidos no Laboratório de recolha de Culturas do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Biociências de Botucatu – UNESP. Os critérios de seleção consideraram uma prevalência média de eventos de 35%, com uma margem de erro de 5%, e um intervalo de confiança de 95%.as estirpes foram isoladas de acordo com Koneman et al.8 isolados de ágar-do-sangue foram submetidos a coloração de Gram para observação da morfologia das Colónias e o teste da catalase foi realizado para confirmação do género Staphylococcus., Foram submetidas estirpes estafilocócicas ao teste de coagulase para diferenciação dos grupos coagulase-negativo e coagulase-positivo. Os isolados Coagulase-negativos foram submetidos a testes bioquímicos para a identificação fenotípica das espécies. A identificação genotípica foi realizada usando primers desenhados sobre sequências conservadas adjacentes a genes 16S e 23S, por sua-PCR (reação em cadeia entre spacer e polimerase transcrita interna), descrita por Couto et al.9 a eficiência de amplificação foi monitorada por eletroforese em agarose de 3% da metáfora e manchada com SYBR Safe., The following lineages of international reference were used: S. auricularis ATCC 33753, S. capitis subsp. capitis ATCC 27843, S. capitis subsp. urealyticus ATCC 49325, S. caprae ATCC 35538, S. cohnii ATCC 49330, S. cohnii subsp. cohnii ATCC 29974, S. epidermidis ATCC 12228, S. epidermidis ATCC 35983, S. hemolyticus ATCC 29970, S. hominis ATCC 27844, S. hominis subsp. novobiosepticus ATCC 700237, S. lentus ATCC 700403, S. lugdunensis ATCC 700328, S. saprophyticus ATCC 15305, S. schleiferi subsp. schleiferi ATCC 43808, S. sciuri subsp. sciuri ATCC 29062, S. simulans ATCC 27851, S., xylosus ATCC 29979, and S. warneri ATCC 10209.o Kit Illustra (GE Healthcare) foi utilizado para a extracção do ADN. Os passos incluíram uma digestão inicial das células estafilocócicas com lisozima (10 mg/mL) e proteinase K (20 mg/mL). Em seguida, 500 µl do tampão de extracção foram adicionados à mistura, que foi centrifugada a 10 000 x g durante 4min. O sobrenadante foi transferido para uma coluna e centrifugado a 5000 g durante 1min. O fluido foi descartado e 500 µl de tampão de extração foram adicionados à coluna., Após a centrifugação e a eliminação do fluido recolhido, foram adicionados 500µL de tampão de lavagem à coluna, que foi submetida a centrifugação a 20.000 g durante 3min. Em seguida, a coluna foi transferida para um tubo de 1, 5 mL e a eluição foi realizada utilizando 200µL de Miliq de água quente a 70°C.
a detecção do gene mecA
PCR foi realizada para a detecção do gene mecA. As reações foram realizadas usando um protocolo descrito por Murakami et al.A eficiência de amplificação foi monitorizada por electroforese num gel de agarose a 2% manchado com segurança SYBR.,o tipo SCCmec foi determinado em estirpes mecA-positivas. As reacções foram realizadas utilizando um protocolo descrito por Oliveira et al.11 modificado por Machado et al.A PCR Multiplex foi realizada em 50 µl de volume de reacção com 1x tampão enzimático, 1.,25 U Taq polymerase DNA, 200 μM dNTP Mix, and the following primers: 10pmol of RIF2 F2 (TTCGAGTTGCTGATGAAGAAGG) and CIF2 R2 (ATTTACCACAAGGACTACCAGC), 6pmol of KDP F1 (AATCATCTGCCATTGGTGATGC) and KDP R1 (CGAATGAAGTGAAAGAAAGTGG), 5pmol of DCS F2 (CATCCTATGATAGCTTGGTC) and DSC R1 (CTAAATCATAGCCATGACCG), 5pmol of RIF4 F3 (GTGATTGTTCGAGATATGTGG), and RIF4 R9 (CGCTTTATCTGTATCTATCGC). For each reaction, 10μL DNA was added. The cycle sequencing reactions were performed at 92°C for 3min, followed by 30 cycles of 92°C for 1min, 56°C for 1min, and 72°C for 1min and 30s., A eficiência de amplificação foi monitorizada por electroforese num gel de agarose a 2% manchado com segurança SYBR.
determinação da concentração inibitória mínima (CMI) pelo teste E a susceptibilidade in vitro das estirpes de CoNS foi testada para os seguintes antimicrobianos: oxacilina, vancomicina, Daptomicina, linezolida, Quinupristina/Dalfopristina e tigeciclina. O microfone dessas drogas foi determinado pelo teste eletrônico. Os critérios utilizados para a classificação da susceptibilidade foram: oxacilina µg / mL (susceptível) para contras, excepto S., lugdunensis (suscetível ≤2µg/mL and resistant ≥4µg/mL); Vancomycin µg/mL (suscetível), 8–16µg/mL (intermediate resistant), and >32µg/mL (resistant); Linezolid ≤4µg/mL (suscetível); Daptomycin ≤1µg/mL; Quinupristin/Dalfopristin ≤1µg/ml (suscetível), 2µg/ml (intermediate), and ≥4µg/ml (Resistant); Tigecycline ≤0.5 µg/ml.,13Screening teste para a detecção de susceptibilidade reduzida à vancomicina
a fim de detectar reduzida suscetibilidade à vancomicina, um exame agar teste preparado com Brain Heart Infusion (BHI Agar e 4µg/mL, 6µg/mL, 8µg/mL, e 16µg/mL de vancomicina foi usado. A estirpe de referência S. aureus ATCC 29213, susceptível à vancomicina, foi utilizada como controlo negativo e a estirpe E. faecalis ATCC 51299, resistente à vancomicina, como controlo positivo. Pontos de um 2.,0 inóculo de McFarland foi adicionado à placa de ágar e incubado a 35°C durante 24h, e o crescimento de pelo menos uma colónia foi considerado como um resultado positivo.
análise da espessura da parede celular
as estirpes CoNS que apresentaram reduzida susceptibilidade à vancomicina foram submetidas à microscopia electrónica de transmissão para análise da espessura da parede celular. As estirpes foram cultivadas em caldo BHI e incubadas a 37 ° C durante 24h. num microtubo, 1000µL de um caldo de Cultura CoNS foram centrifugadas durante um minuto a 12.000 rpm. Depois de descartar o sobrenadante, as estirpes foram fixadas numa solução de Karnovsky (2.,5% de glutaraldeído em tampão fosfato 0,1 M) durante quatro horas . As amostras foram removidas do fixador e lavadas três vezes durante cinco minutos em água destilada. Em seguida, as amostras foram imersas em 0,5% de tetróxido de ósmio para 40min, antes de serem lavadas três vezes para 10min em água destilada. As amostras foram desidratadas utilizando concentrações crescentes de álcool: duas vezes durante 10min em 7.,5% de álcool; duas vezes para 10min em 15% de álcool; duas vezes para 10min em 30% de álcool; duas vezes para 10min em 50% de álcool; três vezes para 15min em 70% de álcool; duas vezes para 15min em 90% de álcool; duas vezes para 10min em 100% de álcool. Após a desidratação os canhotos foram montados e as amostras metalizadas. As análises foram realizadas em uma empresa eletrônica de microscopia Tecnai Spirit Fei e as imagens foram obtidas com uma ampliação de 30000×.,
resultado Daidentificação dos isolados
A Tabela 1 apresenta a fonte dos isolados das espécies de CoNS, bem como os dados demográficos dos doentes com bacteremia.
a detecção do gene mecA e a caracterização do SCCmec a determinação da concentração inibitória mínima (MIC)
os Mic dos antimicrobianos utilizados no tratamento de infecções contra a CoNS foram determinados pelo teste E -. A resistência à oxacilina foi encontrada em 206 (68, 7%) estirpes CoNS e 25 eram resistentes à tigeciclina (8, 3%). Foi detectada resistência à tigeciclina em 4, 5% de S. epidermidis, 13, 8% de S. hemolyticus, 13% de S., hominis e 11,1% de S. lugdunensis. Para a quinupristina/dalfopristina, um isolado de S. epidermidis apresentou resistência intermédia com uma MIC de 2 µg/mL, e uma S. epidermidis e uma s. hemolyticus com MICs de 3 µg / mL. A sensibilidade e especificidade da oxacilina mica pelo E-test em comparação com a presença de mecA foram, respectivamente, 87,4% e 82,3%.no que diz respeito às espécies de CoNS, a distribuição dos parâmetros MIC50 e MIC90 revelou elevadas taxas de resistência à oxacilina em S. hemolyticus., Esta foi a única espécie para a qual a concentração mínima para inibir 50% dos isolados foi >256µg/mL, reflectindo a elevada taxa de resistência de S. hemolítico à oxacilina (Tabela 3).
A gama MIC de cada antimicrobiano foi comparada com o tipo SCCmec. Os isolados tipados como SCCmecI apresentavam MICs de tigeciclina superior e os classificados como SCCmecII apresentavam os MICs de oxacilina mais elevados. As estirpes SCCmecIV apresentaram os valores mais elevados de CMI para a vancomicina, linezolida, Daptomicina e quinupristina/dalfopristina (Quadro 4).
Determination of the MIC range according to SCCmec.
| MIC range (μg/ml) | ||||
|---|---|---|---|---|
| Antimicrobial | SCCmec I | SCCmec II | SCCmec III | SCCmec IV |
| Oxacillin | 0.094≥256 | 6≥256 | 0.,125≥256 | 0.125≥256 |
| Vancomycin | 0.25–2 | 0.38–2 | 0.125–2 | 0.75–2 |
| Linezolid | 0.064–1 | 0.19–0.5 | 0.047–0.75 | 0.064–1 |
| Daptomycin | 0.016–025 | 0.016–0.094 | 0.019–0.5 | 0.047–0.75 |
| Quinupristin/Dalfopristin | 0.025–1.5 | 0.094–0.5 | 0.064–1 | 0.125–2 |
| Tigecycline | 0.016–2 | 0.023–0.75 | 0.016–0.75 | 0.,032-1 |
MIC (Concentração Inibitória Mínima.
Uma avaliação foi realizada de oxacilina e vancomicina MICs ao longo de um período de 20 anos, dividido em três períodos de acordo com a distribuição de oxacilina e vancomicina MIC intervalos. Para a oxacilina, no primeiro período (1990-2001), foram observados valores mais elevados de CIM, mas ainda indicando susceptibilidade., Nos outros períodos (2002-2006 e 2007-2009), observou-se uma diminuição dos valores de CIM, indicando ainda susceptibilidade, bem como um aumento das taxas de resistência. Em relação a vancomicina, a mesma avaliação demonstrou diferenças significativas nos três períodos entre as cepas com MICs de 0.047 µg/mL para de 0,38 µg/mL e de 0,5 µg/mL a 2,0 µg/mL (Fig. 1).
Determinação da susceptibilidade reduzida à vancomicina
Um crescimento de 214 (de 71,3%) cepas foi observado em BHI placa com 4µg/mL de vancomicina, 89 (29.7%) no prato com 6µg/mL de vancomicina, e 8.º, n.º 2.,6%) isolados na placa de vancomicina de 8 µg/mL. Nenhum dos isolados cresceu no meio com 16 µg/mL de vancomicina. Não houve diferenças significativas nos MICs entre estirpes que não apresentaram crescimento na placa complementada com vancomicina e aquelas que cresceram na placa de vancomicina 4µg/mL. Entre os que mostraram crescimento no meio com 6 µg/mL de vancomicina, a gama MIC foi de 0, 5–2 µg/mL. Entre os que cresceram com 8 µg/mL de vancomicina, a gama MIC foi de 0,75–24 µg/mL. As estirpes cultivadas com 8 µg/mL de vancomicina eram quatro S. epidermidis, um S. hemolyticus, dois S. hominis e um S., capitis, todos resistentes à oxacilina, e S. epidermidis e S. capitis serem portadores de SCCmec III, S. hominis de SCCmec I, e S. hemolyticus com o não-escrito SCCmec.a espessura Da Parede Celular na divisão celular foi medida em oito estirpes (os valores são apresentados em nanómetros, média±DP). As quatro estirpes de S. epidermidis apresentavam valores médios de 21.66±1.4, 20.12±0.9, 24.24±1.3, e 14,20 ± 1,3 nm. O isolado de S. hemolyticus mostrou uma espessura Da Parede Celular de 24,88±1,7 nm. Pelo S., isolado de capite, a espessura Da Parede Celular foi 19,33±1,8, e para os dois isolados de S. hominis os valores foram 17,68±2,1 e 24,92±1,5. Para comparação, as estirpes de referência usadas, S. epidermidis ATCC 12228 e S. hemolyticus ATCCC29970, mostraram espessuras das paredes celulares de, respectivamente, 14,61±1,2 e 14,73±0,7 nm. A comparação das estirpes estudadas com os controlos revelou valores mais elevados, variando de 17nm a 24,92 nm, com excepção de um isolado de S. epidermidis, que apresentou um valor inferior em comparação com os controlos (Fig. 2).,
Contras bacteremia evolução
A possível evolução de bacteremia para outras infecções, tais como sepse, pneumonia, infecção urinária, meningite, peritonite, enterocolite necrosante, omphalitis, e abscesso cerebral, foi seguido até em 52 pacientes internados na neonatologia alas. Destes, em 25 (46, 3%) pacientes os mesmos contras isolados da cultura de sangue foi confirmado como sendo o agente etiológico da infecção. Em seis (11, 1%), os contras foram o possível agente de infecção, e em 23 (42, 6%) os contras não estavam relacionados com a infecção do paciente (Fig. 3).,
O gene mecA foi detectado em 33 (61.1%) desses Contras, com 20 (60.6%) Contras associados a infecções graves ou possíveis agentes dessas infecções.
discussão
os contras são considerados uma das principais causas de bacteremia., A importância destas bactérias tem aumentado no ambiente hospitalar durante os últimos anos, principalmente devido à resistência antimicrobiana. No presente trabalho, foram estudadas 300 estirpes de CoNS isoladas de culturas sanguíneas de pacientes internados no Hospital de clínicas de Botucatu, durante um período de 20 anos. Estes isolados foram caracterizados em relação à sua susceptibilidade antimicrobiana.
a detecção de mecA determinou a resistência à oxacilina em 78, 5% das contagens, e o valor de MIC50 (2µg / mL) foi indicativo de Resistência a este fármaco, confirmando a baixa susceptibilidade destas bactérias aos agentes β–lactâmicos., Trabalhos anteriores demonstraram que desde a década de 1970 os isolados de Con apresentaram taxas de resistência à oxacilina mais elevadas do que S. aureus.14,15 as taxas de resistência β–lactama têm variado entre 65% e 95% nos hospitais do Brasil e em outros países.2,16,17 as taxas mais elevadas de resistência à oxacilina foram encontradas em S. epidermidis, seguidas por S. hemolyticus, S. hominis e S. capitis. Resultados similares foram descritos em estudos anteriores, que mostraram resistência à oxacilina em 97% de S. epidermidis entre 1999 e 2001 em uma unidade de cuidados intensivos neonatais (UCIN),18 em 96% de S., hemolyticus isolado no Brasil, 19 e em 100% de S. hominis isolado em uma UCIN da Espanha.20 quanto a S. capitis, resultados discrepantes foram encontrados nos estudos realizados por cairão et al.21 embora em menor frequência, o gene mecA foi detectado em S. warneri e S. lugdunensis. S. warneri foi descrito com taxas de 33,3% de resistência à oxacilina em NICUs,22 e a primeira descrição de mecA em S. lugdunensis foi no estudo conduzido por Kawaguchi et al.23 apesar das baixas taxas de resistência, 24 determinação da susceptibilidade antimicrobiana de S., lugdunensis é importante, não só devido às suas implicações clínicas, uma vez que esta espécie é a mais agressiva dos contras, mas também para o estabelecimento de tratamento precoce com antimicrobianos adequados e bons resultados clínicos.A caracterização do SCCmec mostrou a presença dos tipos I-IV nos isolados, sendo o SCCmecIII o mais frequentemente detectado nas estirpes estudadas, principalmente em S. epidermidis,a única espécie que transportava o tipo IV., O SCCmec tipo III é o maior de todos, codifica vários genes associados à resistência, e é o CoNS mais comumente isolado de espécimes hospitalares. S. epidermidis é o principal Colonizador da pele humana e o mais comumente detectado em locais de infecção. A pressão selectiva no ambiente hospitalar leva à disseminação de estirpes SCCmec III, que estão associadas a infecções graves.O SCCmec tipo IV foi relacionado com Staphylococcus spp.associado à comunidade., e foi descrito pela primeira vez em uma estirpe S. epidermidis, um fato que implica sua transferência de S., epidermidis para S. aureus. Uma transferência de custos reduzida do SCCmec IV devido ao seu pequeno tamanho provavelmente levaria a uma maior incidência de infecções causadas por portadores do SCCmec IV.12,27 SCCmecII apresentou uma associação com S. hemolyticus, semelhante aos achados de Machado et al., 12 cujo trabalho apenas detectou o tipo II nesta espécie.a alternativa para o tratamento de estafilococos resistentes à oxacilina é a vancomicina, um glicopeptídeo utilizado pela primeira vez em 1958 em infecções invasivas. Existem, no entanto, descrições de resistência e susceptibilidade reduzida a este medicamento,6 embora instáveis.,Os resultados do trabalho atual mostraram que, com exceção da oxacilina, a vancomicina era a droga com os valores mais altos de MIC50 e MIC90. Apesar da Total susceptibilidade da colheita, os valores de CIM foram os mais elevados no período de 20 anos, e foi detectada susceptibilidade reduzida em algumas estirpes de S. epidermidis, S. hemolyticus, S. hominis e S. capitis. Nos estudos realizados por Natoli et al.Foi detectada uma susceptibilidade reduzida à vancomicina com uma frequência de 5, 4% entre os isolados CoNS, nas espécies de S. epidermidis e S. hemolyticus., De acordo com os mesmos autores, as colónias de Staphylococcus cultivadas com ágar vancomicina podem levar à heterorresistência glicopeptídica, que pode ser um precursor da resistência aos glicopeptídeos, causando infecções complicadas e falência do tratamento. Este facto deve ser tido em consideração nas decisões terapêuticas.30
o aumento na proporção de CoNS resistentes à oxacilina e a diminuição na sua susceptibilidade à vancomicina enfatizam a importância de estudos envolvendo outras escolhas terapêuticas., Tigecycline, um Gram-positivo e negativo de amplo espectro semi-sintético glycylcycline, é considerada uma droga com excelente atividade contra oxacilina sensíveis e resistentes à Contras,14,29, apesar de nossos dados que mostram taxas de 8,3% de resistência, na maioria das vezes, em S. hemolyticus, seguido por S. hominis, S. lugdunensis, e S. epidermidis. Resultados semelhantes de MIC90 foram descritos para a tigeciclina, sem diferença entre contras resistentes à oxacilina e suscetíveis.31 nos estudos realizados por Natoli et al.A tigeciclina demonstrou uma boa actividade contra os contras., De acordo com esses autores, a tigeciclina não é recomendada para o tratamento da bacteremia e a sua utilização deve ser limitada a fim de preservar a actividade contra bactérias gram-negativas multirresistentes. As mutações nos genes ribossomais S10 e rpsJ e mepA parecem estar associadas à resistência à tigeciclina.32, 33
Quinupristina / dalfopristina é uma streptogramina pertencente ao grupo dos macrolidos-lincosamida-streptogramina., A combinação de quinupristina e dalfopristina é sinérgica e geralmente bactericida quando estes agentes são comparados isoladamente, ou comparados com antimicrobianos macrólidos semelhantes.Neste trabalho, apesar de apresentar excelente eficácia na maioria dos contras estudados, foi detectada resistência intermediária a este medicamento em dois S. epidermidis e um S. hemolyticus. No estudo conduzido por Mendes et al., 35 quinupristina / dalfopristina demonstraram uma excelente eficácia para os contras, as estirpes foram totalmente susceptíveis, com valores de MIC90 de 0, 38 µg/mL para as estirpes susceptíveis à oxacilina e 0.,75 µg / mL para as estirpes resistentes à oxacilina. Além disso, Venkatesh et al.Descreveu uma boa eficácia da quinupristina/dalfopristina para estirpes resistentes e susceptíveis à oxacilina.
Daptomicina, um antimicrobiano estudado durante décadas, voltou a ser utilizado em 2006 para o tratamento da bacteremia e endocardite causadas por Staphylococcus.No presente estudo, a Daptomicina demonstrou uma excelente eficácia para Isolados CoNS, com valores baixos de MIC50. Olivares et al.Verificou-se também a susceptibilidade de todos os contra à Daptomicina, com baixa variação nos valores da CIM., In a work studying 1126 CoNS, conducted by Critchley et al.A Daptomicina foi activa num intervalo de CIM de 0, 015 a 2, 0 µg/mL e o MIC90 foi de 0, 5 µg/mL. De acordo com esses autores, os agentes mais ativos nessas análises foram a Daptomicina e a quinupristina/dalfopristina, que enfatiza a relevância destes antimicrobianos no tratamento de infecções causadas por contras.linezolida, uma oxazolidinona sintética potencialmente activa contra várias bactérias, é outro fármaco que demonstrou uma boa eficácia contra os contras.,Linezolida tornou-se importante para o tratamento terapêutico de infecções crónicas Por contras, apesar da descrição de resistência. No Brasil, o primeiro caso de resistência linezolida foi descrito em 2006, em um isolado clínico de MRSA40 e, entre os contras, em S. epidermidis, S. hominis e S. hemolyticus.41 no trabalho realizado por Olivares et al.,37 apesar da detecção de sete estirpes resistentes aos linezolídeos, este medicamento apresentou valores de CIM efectivos nas estirpes CoNS. Por outro lado, um surto de S. resistente à linezolida., foram notificados clones epidermidis contendo mutações nas proteínas ribossómicas L3 e L4, bem como no plasmídeo cfr, recentemente identificado em França.42
S. hemolyticus foi a espécie que apresentou os valores mais elevados de CIM de oxacilina, e foram necessárias concentrações superiores a 256 µg / mL para inibir 50% dos isolados. Assim como para a oxacilina, esta espécie apresentou valores mais elevados de MIC para a tigeciclina e a maioria dos antimicrobianos testados. Vários trabalhos mostram elevadas taxas de resistência aos antimicrobianos utilizados no tratamento de infecções causadas por S., hemolítico, especialmente meticilina e glicopeptídeos. Alguns autores descrevem uma alta prevalência de genes que codificam resistência a β-lactam e aminoglicosídeo agentes, bem como uma significativa proporção de isolados com valores de cim perto da resistência de ponto de interrupção,43,44, enfatizando a importância do S. hemolyticus como um multiresistant patógeno.
A Associação da Gama de CIM com os tipos SCCmec demonstrou uma maior concentração de MICs para a vancomicina, linezolida, Daptomicina e quinupristina/dalfopristina em S. epidermidis que transportam SCCmecIV., Os genes relacionados com a resistência a estes antimicrobianos são mediados por plasmídeos, encontrados principalmente em estirpes resistentes à meticilina com origem hospitalar.45 SCCmec IV é característica dos isolados comunitários, especialmente devido à sua dimensão e baixo custo adaptativo. Estudos sugerem que a aquisição de genes de resistência tem origem ambiental não Clínica, dada a grande diversidade de portadores de genes de resistência no ambiente natural.46,47 além disso, o SCCmecIV só foi detectado em S. epidermidis, que como a espécie mais comum na pele humana é a mais influenciada pela pressão seletiva., O maior MICs comparado a outros antimicrobianos pode também estar relacionada com a pressão seletiva, como o nível de exposição a estes medicamentos em ambiente hospitalar seria o viés de seleção da redução da susceptibilidade de estirpes resistentes, uma vez que vários eventos de mutação, recombinação genética, e modificações na fisiologia microbiana são necessários para gerar alterações fenotípicas.,48 alterações metabólicas e fisiológicas
relacionadas com a pressão selectiva puderam ser observadas em estirpes cultivadas com ágar de vancomicina de 8 µg / mL, uma vez que o espessamento Da Parede Celular foi encontrado na maioria dos isolados con devido ao aumento da síntese de peptidoglicanos. Este mecanismo é mais vantajoso para os contras do que a aquisição da van operon, que é um mediador da resistência à vancomicina. O van operon é adquirido pela transferência horizontal de genes e a sua expressão só é estimulada na presença de glicopeptídeo., Este estímulo provoca um custo adaptativo muito elevado na presença de vancomicina, sendo desvantajoso para os contras em um meio de vancomicina.48,49 no que se refere à aquisição de outros genes de resistência em CoNS, como o gene mecA, o custo inicial adaptativo é atenuado por mutações adicionais compensatórias para os “custos”de resistência. Recentemente, mutações pontuais em genes como o vraR demonstraram estar associadas a uma reduzida susceptibilidade à vancomicina e ao espessamento Da Parede Celular em staphylococci.,50
O presente estudo mostrou uma alta taxa de bacteremia causada por Contras neonatal e pediátrica unidades, envolvendo crianças menores de um ano de idade, os principais agentes de ser de S. epidermidis, S. hemolyticus, S. hominis, S. lugdunensis, e S. warneri. S. capite não foi isolada nestas unidades, sendo agentes de bacteremia em adultos admitidos no Internal medicine ward, Gastroenterologia, neurologia e urgências.,dado que o estudo envolveu bacteremia causada por estafilococos isolados durante mais de 30 anos, grande parte dos dados associados aos registos médicos dos doentes não puderam ser recuperados, pelo que não foi possível associar o resultado da infecção de todos os doentes, o que constitui uma limitação do estudo actual. Os dados obtidos a partir de pacientes em unidades neonatais indicaram a importância clínica da bacteremia contras, que pode progredir para doenças que requerem cuidados especializados.o conhecimento da resistência antimicrobiana é de grande importância para o tratamento correto de infecções causadas por contras., Além disso, os factores de virulência destas bactérias e a imunidade dos doentes são factores que contribuem para a capacidade do microrganismo causar infecções mais graves.
os resultados do nosso estudo ao longo de 20 anos mostraram uma elevada frequência de resistência antimicrobiana em conts, o que reflecte o uso excessivo destes medicamentos., Para além das modificações metabólicas e fisiológicas que podem levar a uma reduzida susceptibilidade aos antimicrobianos, a sua condição como bactérias comensais humanas torna-os transportadores ideais e um reservatório eficiente de genes de resistência, especialmente os elementos de baixo custo, como o SCCmec.Os agentes antimicrobianos que apresentaram os melhores resultados devem ser utilizados de modo a preservar a sua eficácia e prevenir a resistência.,os autores declaram que a pesquisa foi realizada na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que possam ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.