Objetivos
- Identificar e descrever os meios de cultura para o crescimento de bactérias, incluindo exemplos de todos-propósito de mídia, enriquecido, seletiva, diferenciais, definidos e enriquecimento media
O estudo de microorganismos é muito facilitada se somos capazes cultura deles, isto é, para manter a reprodução de populações vivo sob condições de laboratório., A cultura de muitos microorganismos é um desafio devido às necessidades nutricionais e ambientais altamente específicas e à diversidade dessas necessidades entre as diferentes espécies.o número de meios disponíveis para o crescimento de bactérias é considerável. Alguns meios de comunicação são considerados meios gerais de todos os fins e suportam o crescimento de uma grande variedade de organismos. Um exemplo principal de um meio para todos os fins é o caldo de soja tríptico (TSB). Meios especializados são usados na identificação de bactérias e são complementados com corantes, indicadores de pH, ou antibióticos., Um tipo, meios enriquecidos, contém fatores de crescimento, vitaminas e outros nutrientes essenciais para promover o crescimento de organismos fastidiosos, organismos que não podem fazer certos nutrientes e exigem que eles sejam adicionados ao meio. Quando a composição química completa de um meio é conhecida, ele é chamado de meio quimicamente definido. Por exemplo, no meio EZ, todos os componentes químicos individuais são identificados e as quantidades exatas de cada um são conhecidas. Em meios complexos, que contêm extratos e digestos de leveduras, carne ou plantas, a composição química precisa do meio não é conhecida., As quantidades de componentes individuais são indeterminadas e variáveis. Caldo de nutrientes, caldo de soja tríptico e infusão cerebral são exemplos de meios complexos.
Figura 1. Nesta placa de ágar MacConkey, as colónias de E. coli fermentadores de lactose são cor-de-rosa brilhante. Serratia marcescens, que não fermenta a lactose, forma uma faixa de cor creme no meio bronzeado., (credit: American Society for Microbiology)
Media que inibem o crescimento de microorganismos indesejados e suportam o crescimento do organismo de interesse, fornecendo nutrientes e reduzindo a concorrência são chamados meios seletivos. Um exemplo de um meio seletivo é o MacConkey agar. Contém sais biliares e violeta cristalina, que interferem com o crescimento de muitas bactérias gram-positivas e favorecem o crescimento de bactérias gram-negativas, particularmente as Enterobacteriaceae. Estas espécies são comumente denominadas entéricas, residem no intestino, e são adaptadas à presença de sais biliares., As culturas de enriquecimento promovem o crescimento preferencial de um microrganismo desejado que representa uma fracção dos organismos presentes num inóculo. Por exemplo, se queremos isolar bactérias que quebram o petróleo bruto, bactérias hidrocarbonoclastas, subcultura sequencial em um meio que fornece carbono apenas na forma de petróleo bruto irá enriquecer as culturas com bactérias que comem petróleo. A mídia diferencial torna fácil distinguir as colônias de diferentes bactérias por uma mudança na cor das colônias ou a cor do meio., Mudanças de cor são o resultado de produtos finais criados pela interação das enzimas bacterianas com substratos diferenciais no meio ou, no caso de reações hemolíticas, a lise dos glóbulos vermelhos no meio. Na Figura 1, a fermentação diferencial da lactose pode ser observada na ágar MacConkey. Os fermentadores de lactose produzem ácido, que transforma o meio e as colônias de fermentadores fortes em rosa quente. O meio é complementado com o indicador de pH vermelho neutro, que se transforma em rosa quente a baixo pH., Meios seletivos e diferenciais podem ser combinados e desempenhar um papel importante na identificação de bactérias por métodos bioquímicos.
pense nisso
- distinguir meios complexos e quimicamente definidos.distinguir meios selectivos e de enriquecimento.
o Picnic do fim do ano
o departamento de Microbiologia celebra o fim do ano escolar em Maio, realizando o seu piquenique tradicional no verde., Os discursos arrastam-se por algumas horas, mas finalmente todos os professores e alunos podem cavar na comida: salada de frango, tomates, cebolas, salada e torta de creme. À noite, todo o departamento, exceto dois estudantes vegetarianos que não comeram a salada de frango, é atingido por náuseas, vômitos, retoque e cãibras abdominais. Vários indivíduos queixam-se de diarreia. Um doente apresenta sinais de choque (pressão arterial baixa). Amostras de sangue e fezes são coletadas de pacientes, e uma análise de todos os alimentos servidos na refeição é realizada.,
As bactérias podem causar gastroenterite (inflamação do estômago e do tracto intestinal) quer colonizando e replicando no hospedeiro, que é considerado uma infecção, ou segregando toxinas, que é considerado intoxicação. Sinais e sintomas de infecções são tipicamente retardados, enquanto que a intoxicação se manifesta dentro de horas, como aconteceu após o piquenique.as amostras de sangue dos doentes não mostraram sinais de infecção bacteriana, o que sugere que se tratou de um caso de intoxicação., Uma vez que a intoxicação é devido a toxinas secretadas, as bactérias não são geralmente detectados em amostras de sangue ou fezes. As placas de ágar MacConkey e sorbitol-MacConkey e de xilose-lisina-desoxicolato (XLD) foram inoculadas com amostras de fezes e não revelaram quaisquer colónias invulgarmente coloridas, e não foram observadas colónias Negras ou colónias brancas no XLD. Todos os fermentadores de lactose na ágar MacConkey fermentam também sorbitol. Estes resultados excluíram agentes comuns de doenças de origem alimentar: E. coli, Salmonella spp., e Shigella spp.
Figura 2., Cocci Gram-positivo em aglomerados. (credit: Centers for Disease Control and Prevention)
a análise da salada de frango revelou um número anormal de cocci gram-positivos dispostos em aglomerados (Figura 2). Uma cultura do cocci gram-positivo liberta bolhas quando misturadas com peróxido de hidrogénio. A cultura tornou o sal de manitol amarelo-ágar após uma incubação de 24 horas.todos os testes apontam para Staphylococcus aureus como o organismo que secretou a toxina. Amostras da salada mostraram a presença de bactérias Cocci gram-positivas em aglomerados. As colónias deram positivo para catalase., A bactéria cresceu sobre o sal de manitol fermentando manitol, como demonstrado pela mudança para amarelo do meio. O indicador de pH em ágar de sal de manitol é vermelho de fenol, que se torna amarelo quando o meio é acidificado pelos produtos de fermentação.sabe-se que a toxina secretada por S. aureus causa gastroenterite grave. O organismo foi provavelmente introduzido na salada durante a preparação pelo tratador de alimentos e multiplicado enquanto a salada era mantida à temperatura ambiente quente durante os discursos.,quais são alguns outros fatores que podem ter contribuído para o rápido crescimento de S. aureus na salada de frango?porque é que S. aureus não seria inibido pela presença de sal na salada de frango?os meios de constituição química definida contêm apenas componentes quimicamente conhecidos.os meios seletivos favorecem o crescimento de alguns microrganismos enquanto inibem outros.,os meios enriquecidos contêm nutrientes essenciais adicionados aos quais um organismo específico necessita de crescer. os meios diferenciais ajudam a distinguir as bactérias pela cor das colónias ou pela Alteração do meio.agar é um meio utilizado na identificação e isolamento de bactérias patogénicas. Contém proteínas de carne digeridas como fonte de nutrientes orgânicos. Dois corantes indicadores, a eosina e o azul de metileno, inibem o crescimento de bactérias gram-positivas e distinguem entre os organismos fermentadores de lactose e os organismos fermentadores de não-lactose., Os fermentadores de Lactose formam colónias metálicas verdes ou roxas profundas, enquanto os fermentadores de não-lactose formam colónias completamente incolor. EMB agar é um exemplo de qual dos seguintes?
- um meio selectivo apenas
- um diferencial médio de apenas
- um meio selectivo e um quimicamente definido médio
- um meio selectivo, um diferencial médio, e um complexo de médio
preencher o branco
ágar de sangue contém muitos nutrientes não especificados, suporta o crescimento de um grande número de bactérias, e permite a diferenciação de bactérias de acordo com hemólise (decomposição do sangue). O suporte é _ _ _ _ _ _ _ _ e_________.