Peptidoglycan Análise da Estrutura

Peptidoglycan (também referido como murein), um elemento essencial e componente específico da célula bacteriana envelope, forma uma malha como camada exterior da membrana citoplasmática, é responsável pela rigidez e forma das células bacterianas e protege-los da ruptura osmótica. De facto, qualquer inibição da sua biossíntese (mutação, antibiótico) ou da sua degradação específica (por exemplo, por lisozima) durante o crescimento celular resultará na lise celular., O peptidoglicano também contribui para a manutenção de uma forma celular definida e serve como suporte para ancorar outros componentes do Invólucro celular, tais como proteínas e ácidos teicóicos. Está intimamente envolvido nos processos de crescimento celular e divisão celular. É um polímero que ocorre em paredes celulares de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, mas não foi encontrado em Archaea. Em bactérias Gram-positivas representa cerca de 30-70% da parede celular, além de polissacáridos, ácidos teicóicos ou teichurônicos., É apenas um componente menor em paredes celulares Gram-negativas que consistem principalmente de lipopolissacarídeos e lipoproteínas. A investigação da estrutura peptidoglicana exerce um papel vital na compreensão das respostas imunitárias, a ação dos antibióticos e mecanismos de resistência, susceptibilidade de fagose e comportamento serológico, e na classificação e identificação de bactérias.o peptidoglicano é um heteropolímero constituído por fios de glicano que são reticulados por péptidos., A espinha dorsal do glicano é composta por unidades alternadas de N-acetilglucosamina e ácido N-acetilmurâmico ligado por ligações β-1,4-glicosídicas. As subunidades de péptidos geralmente contêm quatro aminoácidos L – E D-alternantes, e eles estão conectados ao glicano através dos grupos lactilo dos resíduos de ácido N-acetilmurâmico. A ligação cruzada das cadeias glican ocorre geralmente entre o grupo carboxilo de D-Ala na posição 4 e o grupo amino do ácido diamino na posição 3, quer directamente quer através de uma ponte peptídica curta.

Figura 1., Representação esquemática da estrutura da rede peptidoglicana

o peptidoglicano tem uma estrutura tridimensional reticulada; portanto, é tipicamente um polímero insolúvel. A análise estrutural do peptidoglicano geralmente envolve hidrólise em aminoácidos, péptidos e aminoácidos ou Digestão Enzimática de cadeias de glicanos para muropeptídeos, a fim de obter informações estruturais de seus constituintes. Dependendo da complexidade da estrutura peptidoglicana, deve ser aplicada uma ampla gama de técnicas analíticas (por exemplo, TLC, 2D-TLC, GC, MS)., A hidrólise Total seguida de 2D-TLC ou GC / MS pode ser utilizada para detectar a composição dos aminoácidos do peptidoglicano de forma qualitativa ou quantitativa. Os enantiômeros de aminoácidos podem ser analisados por cromatografia em fase gasosa usando uma coluna quiral. O n-terminus do interpéptido por dinitrofenilação também pode ser determinado por TCL. Em alguns casos, a hidrólise parcial seguida de 2D-TLC pode ser usada para analisar peptídeos curtos. Com especialistas experientes e anos de experiência, a Creative Proteomics oferece uma análise de estrutura precisa e confiável para peptidoglicanos.,

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