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Aspirina”s Antiplaquetários Efeito

muito antes de os médicos realizados ensaios clínicos que testaram o Dr. Craven”s observações, médico-investigador e basic cientistas estavam a fazer perguntas sobre os mecanismos básicos de ativação de plaquetas e sobre distúrbios hemorrágicos associadas a plaquetas defeitos. Em 1950, foi estabelecido que doses elevadas de aspirina prolongaram o tempo de protrombina 22–24—um fato também observado por Craven.,Contudo, mesmo doses demasiado baixas para afectar o tempo de protrombina pareceram suficientes para prevenir a trombose coronária, o que perturbou Craven. Como a aspirina foi associada a sangramento e doses invulgarmente altas prolongadas de tempo de protrombina, muitos médicos na década de 1940 estavam prescrevendo aspirina juntamente com vitamina K (mesmo em uma forma combinada de pílula), sob o falso pressuposto de que a vitamina K adicional poderia de alguma forma compensar o aumento de sangramento. Até Craven fez esta suposição incorreta.,19 estudos posteriores de cientistas básicos e investigadores clínicos se dirigiriam a estas e outras questões fundamentais.a aterosclerose e o enfarte do miocárdio são o resultado de processos inflamatórios e trombóticos. Na segunda metade do século XX, a humanidade avançou muito na sua compreensão destes processos. Hemostase e inflamação já foram considerados distintos, mas agora sabemos que esses 2 processos são muitas vezes ligados. Durante a inflamação ou lesão, os leucócitos rolam ao longo e aderem a células endoteliais ativadas que line a parede dos vasos sanguíneos., A laminação leucocitária é mediada principalmente pelas selectinas e seus ligantes 25,enquanto a adesão firme é mediada pelas integrinas e seus ligantes.Os leucócitos firmemente aderentes transmigram subsequentemente através do endotélio. Em contraste com os leucócitos, as plaquetas aderentes permanecem no lúmen dos vasos sanguíneos e continuam a acumular-se para o centro do lúmen. Quando a parede dos vasos sanguíneos é ferida o suficiente para denudar o endotélio, as plaquetas ligam-se ao factor subendotelial von Willebrand e ao colagénio, e as plaquetas fluem para as plaquetas já aderentes e activadas.,Sabe-se que uma variedade de estímulos, incluindo trombina, difosfato de adenosina (ADP) e colagénio, causam activação, disseminação e agregação plaquetária. O difosfato de adenosina é armazenado dentro dos grânulos densos de plaquetas e é libertado após a activação celular, mas causa apenas uma agregação reversível modesta. No entanto, a ADP desempenha um papel importante no início de sinais que levam a alterações da forma plaquetária e à síntese de tromboxano A2, que é um potente ativador de plaquetas., Quando uma plaquetas é activada e os seus grânulos densos libertam o seu conteúdo, a ADP liga-se aos seus receptores nas mesmas plaquetas e nas plaquetas vizinhas, assim como o tromboxano A2 ao seu receptor. O difosfato de adenosina amplifica a resposta das plaquetas a outros agonistas. Esta cascata de adesão leva à formação de grandes agregados de plaquetas que são simultaneamente procoagulantes e pró-inflamatórios. O trombo resultante pode ocultar facilmente o lúmen de uma artéria coronária aterosclerótica já estreitada, causando assim um enfarte do miocárdio.,28,29

muitos cientistas contribuíram para a nossa compreensão actual da aspirina e da função plaquetária, e não é prático contar cada uma das suas histórias. Em vez disso, este artigo centra-se em alguns dos investigadores cujas descobertas ajudaram a revigorar o interesse clínico no uso de aspirina para prevenir eventos cardiovasculares. No final dos anos 60, o Dr. Harvey J. Weiss30, 31 fez a seguinte pergunta importante: “a aspirina afeta as plaquetas? Weiss estava estudando pacientes com deficiência de fator 3 plaquetário, uma doença na qual as plaquetas exibem liberação defeituosa de ADP.,Ao mesmo tempo, o Dr. Armand Quick29 estava examinando o efeito da aspirina no tempo de hemorragia, descobrindo que doses muito baixas de aspirina prolongavam o tempo de sangramento, mesmo que doses baixas não tivessem efeito no tempo de protrombina. Rápido também achei que a aspirina tinha um efeito desproporcional sobre o sangramento vezes de pacientes com doença de von Willebrand, e ele com a hipótese de que baixas doses de aspirina pode prolongar o tempo de sangramento em pacientes normais, criando um defeito semelhante ao encontrado na doença de von Willebrand.,Weiss teorizou que o prolongamento associado à aspirina do tempo de hemorragia pode resultar de agregação plaquetária defeituosa devido à libertação de ADP deficiente. Suas descobertas, publicadas em vários artigos, 30-32 mostraram que a aspirina prejudica tanto a liberação de ADP e agregação plaquetária secundária dependente de ADP (Fig. 3). Notavelmente, Weiss também descobriu que o salicilato de sódio não teve tal efeito na libertação de ADP ou agregação plaquetária, o que sugeriu que a atividade antiplaquetária da aspirina era dependente da modificação acetila que diferencia a aspirina do ácido salicílico., Outros grupos confirmaram esta diferença entre ácido salicílico e aspirina.29,33 Weiss relatou que o efeito da aspirina sobre as plaquetas foi rápido e irreversível, inibindo a agregação plaquetária durante a vida de uma plaquetas. Juntamente com os achados de vários outros grupos, a descoberta do Dr. Weiss foi um passo fundamental na compreensão do mecanismo pelo qual baixas doses de aspirina poderia prevenir trombose coronária e cerebral. Por exemplo, James Mustard, Marian Packham, E Geoffrey Evans e seus colegas 34–36 também demonstraram que a aspirina poderia inibir a agregação de plaquetas., Embora este trabalho tenha demonstrado que a aspirina tinha efeitos antiplaquetários, não revelou o mecanismo molecular específico pelo qual a aspirina exerceu esses efeitos. Diferenças nos efeitos do ácido salicílico e aspirina (ácido acetilsalicílico) sugeriram que o grupo acetilo estava de alguma forma envolvido. Um laboratório relatou que um grupo acetilo marcado radioactivamente a partir do ácido acetilsalicílico foi seletivamente encontrado nas plaquetas após o tratamento com aspirina, enquanto um grupo carboxilo marcado radioactivamente não foi incorporado nas plaquetas.37

enquanto Harvey Weiss estava examinando o efeito da aspirina na agregação plaquetária, outros estavam conduzindo experimentos para estudar in vivo as funções das prostaglandinas e os efeitos da aspirina na sua libertação. Weiss já tinha resolvido uma grande peça do quebra-cabeça, tendo mostrado que a aspirina inibiu a agregação plaquetária. Ao mesmo tempo, os pesquisadores de prostaglandina Priscilla Piper e Sir John Vane estavam perguntando se a aspirina poderia afetar a biossíntese das prostaglandinas., No início da década de 1960, Vane desenvolveu um método para avaliar a produção de várias substâncias por meio de perfusão de órgãos isolados, que ele chamou de bioensaio de superfusão em cascata.Neste ensaio, o sangue ou a solução salina artificial foram perfurados sobre o tecido do ensaio isolado, tendo sido também introduzidas várias substâncias de ensaio. Vane fez várias inovações para técnicas de bioensaio anteriores, como a superfusão de um órgão com sangue de uma veia ou artéria de um animal e, em seguida, retornar o sangue para uma veia grande. Foi laureado com o Nobel de Fisiologia ou Medicina de 1982., Estas inovações seriam vitais para compreender os efeitos da aspirina a nível molecular. Vane comentou que o ” elemento de instantaneidade é um aspecto importante do bioensaio de superfusão em cascata na medida em que ele detecta a atividade biológica de compostos quimicamente instáveis cuja atividade seria perdida no processo de extração.”39 usando esta abordagem, Vane e Piper estudaram substâncias libertadas durante a anafilaxia.40 eles descobriram a libertação de prostaglandinas e uma molécula chamada “substância contra a aorta de coelho” (RCS, mais tarde renomeada para tromboxano A2)., O RCS foi considerado altamente instável, e esse fato foi crucial para suas descobertas posteriores: um atraso de alguns minutos foi suficiente para evitar o efeito do RCS no tecido do ensaio. Em ensaios usando pulmão de cobaia, eles descobriram que a aspirina bloqueou a libertação de RCS e também prostaglandinas. Palheta descreveu suas experiências:

Enquanto eu estava escrevendo um artigo de revisão sobre o fim-de-semana, incluindo os resultados de algumas dessas experiências, um pensamento me ocorreu que, talvez, deveria ter sido óbvio anteriormente., Em todas estas experiências (e nas de muitos outros trabalhadores), a “libertação” das prostaglandinas deve, de facto, constituir uma nova síntese das prostaglandinas. Ou seja, a produção de prostaglandina nestas experiências, embora muito baixa, era ainda muito mais elevada do que o conteúdo inicial dos tecidos das hormonas. Evidentemente, então, os vários estímulos, mecânicos e químicos, que liberaram prostaglandinas, estavam de fato “ativando” a síntese desses compostos. Um corolário lógico era que a aspirina poderia estar bloqueando a síntese das prostaglandinas.,39

Vane testou sua hipótese introduzindo aspirina em um experimento que usou o sobrenadante de um homogenado celular conhecido por gerar prostaglandinas. Sua hipótese provou ser correta, pois a aspirina inibiu a geração de RCS e prostaglandinas de forma dependente da dose.41,42 Smith e Willis43 testaram a mesma hipótese em pacientes que tinham tomado 600 mg de aspirina, após o que as plaquetas foram isoladas e estimuladas com trombina. Eles descobriram que a síntese das prostaglandinas era especificamente inibida pela aspirina,43 O que era consistente com o relatório de Vane., A enzima que a aspirina inibe-mais tarde revelou ser a ciclooxigenase – 1 (COX-1) (Fig. 4) – desempenha um papel fundamental na síntese das prostaglandinas e tromboxano A2. Colectivamente, o trabalho destes cientistas revelou que os efeitos da aspirina na agregação plaquetária resultam da inibição da COX-1 (reduzindo assim a síntese tromboxano-A2) e inibição da resposta ao tromboxano (que depende da ADP para amplificação). Roth e associates44 mostraram que a aspirina inibe irreversivelmente a COX-1 pela acetilação de um resíduo de serina, impedindo assim a ligação do ácido araquidónico., Nas plaquetas, a inibição irreversível da COX-1 tem uma consequência particular, uma vez que a síntese de qualquer nova enzima é mínima nestas células anucleares. Esta característica das plaquetas leva a uma inibição mais profunda e prolongada da função plaquetária, em comparação com os efeitos da aspirina nas células que contêm núcleos. As contribuições destes e de outros cientistas provavelmente revigoraram o interesse no uso de aspirina para prevenir eventos cardiovasculares, o que levou aos primeiros ensaios clínicos que testaram diretamente as reivindicações de Craven.