Obiectivele de Învățare
- Identifica și de a descrie medii de cultură pentru dezvoltarea bacteriilor, inclusiv exemple de toate-scop, mass-media, îmbogățit, selectiv, diferențial, definit, și de îmbogățire a mass-media
studiul microorganismelor este mult facilitată dacă suntem capabili să culturii lor, care este, pentru a menține reproducere a populațiilor în viață în condiții de laborator., Cultivarea multor microorganisme este dificilă din cauza cerințelor nutriționale și de mediu foarte specifice și a diversității acestor cerințe între diferite specii.
cerințe nutriționale
numărul de medii disponibile pentru creșterea bacteriilor este considerabil. Unele medii sunt considerate medii generale universale și susțin creșterea unei mari varietăți de organisme. Un prim exemplu de mediu universal este bulionul de soia triptic (TSB). Mediile specializate sunt utilizate în identificarea bacteriilor și sunt completate cu coloranți, indicatori de pH sau antibiotice., Un tip, mediu îmbogățit, conține factori de creștere, vitamine și alți nutrienți esențiali pentru a promova creșterea organismelor fastidioase, organisme care nu pot face anumite substanțe nutritive și necesită adăugarea lor în mediu. Când se cunoaște compoziția chimică completă a unui mediu, se numește mediu definit chimic. De exemplu, în mediul EZ, toate componentele chimice individuale sunt identificate și cantitățile exacte ale fiecăruia sunt cunoscute. În mediile complexe, care conțin extracte și digerări de drojdii, carne sau plante, compoziția chimică precisă a mediului nu este cunoscută., Cantitățile de componente individuale sunt nedeterminate și variabile. Bulionul nutritiv, bulionul de soia triptică și infuzia de inimă a creierului sunt toate exemple de medii complexe.
Figura 1. Pe această placă de agar MacConkey, coloniile de lactoză-fermentator E. coli sunt roz roz. Serratia marcescens, care nu fermentează lactoza, formează o dungă de culoare crem pe mediul bronzat., mediile care inhibă creșterea microorganismelor nedorite și susțin creșterea organismului de interes prin furnizarea de nutrienți și reducerea concurenței se numesc medii selective. Un exemplu de mediu selectiv este agarul MacConkey. Conține săruri biliare și violet de cristal, care interferează cu creșterea multor bacterii gram-pozitive și favorizează creșterea bacteriilor gram-negative, în special Enterobacteriaceae. Aceste specii sunt denumite în mod obișnuit enterice, locuiesc în intestin și sunt adaptate la prezența sărurilor biliare., Culturile de îmbogățire favorizează creșterea preferențială a unui microorganism dorit care reprezintă o fracțiune din organismele prezente într-un inocul. De exemplu, dacă vrem să izola bacterii care descompun țiței, hydrocarbonoclastic bacterii, secvențială subcultivare într-un mediu care furnizează carbon numai în formă de țiței va îmbogăți culturi cu ulei-consumul de bacterii. Mediile diferențiale facilitează distingerea coloniilor de bacterii diferite printr-o schimbare a culorii coloniilor sau a culorii mediului., Modificările de culoare sunt rezultatul produselor finale create prin interacțiunea enzimelor bacteriene cu substraturi diferențiale în mediu sau, în cazul reacțiilor hemolitice, Liza globulelor roșii în mediu. În Figura 1, fermentația diferențială a lactozei poate fi observată pe agar MacConkey. Fermentatorii de lactoză produc acid, care transformă mediul și coloniile de fermentatori puternici roz. Mediul este suplimentat cu indicatorul de pH neutru roșu, care se transformă în roz fierbinte la pH scăzut., Mediile Selective și diferențiale pot fi combinate și joacă un rol important în identificarea bacteriilor prin metode biochimice.
gândiți-vă
- distingeți mediile complexe și definite chimic.
- distingeți mediile selective și de îmbogățire.
Picnicul de sfârșit de an
Departamentul de Microbiologie sărbătorește sfârșitul anului școlar în luna mai, ținând picnicul tradițional pe verde., Discursurile durează câteva ore, dar în cele din urmă toți profesorii și studenții pot săpa în mâncare: salată de pui, roșii, ceapă, salată și plăcintă cu cremă. Până seara, întregul departament, cu excepția a doi studenți vegetarieni care nu au mâncat salata de pui, este lovit de greață, vărsături, vărsături și crampe abdominale. Mai multe persoane se plâng de diaree. Un pacient prezintă semne de șoc (tensiune arterială scăzută). Probele de sânge și scaun sunt colectate de la pacienți și se efectuează o analiză a tuturor alimentelor servite la masă.,bacteriile pot provoca gastroenterită (inflamația stomacului și a tractului intestinal) fie prin colonizarea și replicarea în gazdă, care este considerată o infecție, fie prin secretarea toxinelor, care este considerată intoxicație. Semnele și simptomele infecțiilor sunt de obicei întârziate, în timp ce intoxicația se manifestă în câteva ore, așa cum s-a întâmplat după picnic.probele de sânge de la pacienți nu au prezentat semne de infecție bacteriană, ceea ce sugerează în continuare că acesta a fost un caz de intoxicare., Deoarece intoxicația se datorează toxinelor secretate, bacteriile nu sunt de obicei detectate în probele de sânge sau scaun. Plăcile de agar MacConkey și sorbitol-MacConkey agar și plăcile de xiloză-lizină-deoxicolat (XLD) au fost inoculate cu probe de scaun și nu au evidențiat colonii neobișnuit de colorate și nu au fost observate colonii negre sau colonii albe pe XLD. Toți fermentatorii de lactoză de pe agar MacConkey fermentează și sorbitol. Aceste rezultate au exclus agenții comuni ai bolilor transmise de alimente: E. coli, Salmonella spp., și Shigella spp.
Figura 2., Cocci Gram-pozitivi în clustere. (credit: Centre pentru Controlul și Prevenirea Bolilor)
analiza salatei de pui a evidențiat un număr anormal de cocci gram-pozitivi aranjați în clustere (Figura 2). O cultură a cocilor gram-pozitivi eliberează bule atunci când este amestecată cu peroxid de hidrogen. Cultura a transformat sarea de manitol galben agar după o incubație de 24 de ore.toate testele indică Staphylococcus aureus ca organism care a secretat toxina. Probele din salată au arătat prezența bacteriilor cocci gram-pozitive în clustere. Coloniile au fost pozitive pentru catalază., Bacteriile au crescut pe sare de manitol agar fermentând manitol, așa cum arată schimbarea la galben a mediului. Indicatorul pH din agarul de sare de Manitol este roșu fenol, care devine galben atunci când mediul este acidificat de produsele de fermentație.se știe că toxina secretată de S. aureus provoacă gastroenterită severă. Organismul a fost probabil introdus în salată în timpul pregătirii de către manipulatorul de alimente și înmulțit în timp ce salata a fost păstrată la temperatura ambiantă caldă în timpul discursurilor.,care sunt alți factori care ar fi putut contribui la creșterea rapidă a S. aureus în salata de pui?
concepte cheie și rezumat
- mediile definite chimic conțin numai componente cunoscute chimic.mediile Selective favorizează creșterea unor microorganisme în timp ce inhibă altele.,
- mediile îmbogățite conțin substanțe nutritive esențiale adăugate un anumit organism trebuie să crească
- mediile diferențiate ajută la distingerea bacteriilor prin culoarea coloniilor sau schimbarea mediului.
variante multiple
agar EMB este un mediu utilizat în identificarea și izolarea bacteriilor patogene. Conține proteine din carne digerate ca sursă de nutrienți organici. Două coloranți indicator, eozina și albastru de metilen, inhibă creșterea bacteriilor gram-pozitive și disting între organismele de fermentare a lactozei și cele de fermentare a nelactozei., Fermentatorii de lactoză formează colonii metalice de culoare verde sau violet profund, în timp ce fermentatorii de nelactoză formează colonii complet incolore. EMB agar este un exemplu de care dintre următoarele?
- un mediu selectiv doar
- un diferențial de mediu
- un mediu selectiv și o compoziție chimică definită mediu
- un mediu selectiv, un diferențial mediu, și un complex de mediu