Mannitol Salt Agar (MSA) (Čeština)

Naposledy Aktualizován dne 4. února 2021 podle Sagar Aryal

Úvod Mannitol Salt Agar (MSA)

Mannitol Salt Agar (MSA) se používá jako selektivní a diferenciální médium pro izolaci a identifikaci bakterie Staphylococcus aureus z klinických a neklinických vzorků., Doporučuje se pro detekci a stanovení počtu koaguláza-pozitivních Stafylokoků v mléce, potravinách a dalších vzorcích a podporuje růst skupiny některých bakterií a potlačuje růst ostatních.

Princip Mannitol Salt Agar (MSA)

Mannitol Salt Agar obsahuje hovězí extrakt a proteose peptonu, který dělá to velmi výživné, neboť poskytují základní růstové faktory a stopové živiny, jako jsou dusík, vitamíny, minerály a aminokyseliny nezbytné pro růst. Médium obsahuje 7.,5% koncentrace chloridu sodného, která vede k částečné nebo úplné inhibici jiných bakteriálních organismů než stafylokoků. Mannitol je fermentovatelný zdroj uhlohydrátů, jehož fermentace vede k produkci kyseliny. Staphylococcus aureus roste na tomto médiu a fermentuje mannitol k produkci žlutých kolonií. Většina koagulázových negativních druhů stafylokoků a Mikrokoků nekvasí mannitol a roste jako malé červené kolonie. Barva kolonií a média je způsobena reaktivitou fenolově červené (indikátoru) na pH média. Fenolová červená je červená při pH 8.,4 a fenolová červená je žlutá při pH 6.8. Agar je zpevňující činidlo. Kromě toho lze do média přidat emulzi vaječného žloutku 5% V/V, která umožňuje detekci lipázové aktivity stafylokoků spolu s fermentací mannitolu. Sůl vyčistí emulzi vaječného žloutku a produkce lipázy je detekována jako žlutá neprůhledná zóna kolem kolonií.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.

Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)

1. Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
2. Boil to dissolve the medium completely.,
3. sterilizujte autoklávováním na 15 liber. tlak (121°C) po dobu 15 minut.
4. pokud je to žádoucí, sterilní emulze vaječného žloutku (E7899) může být přidána do konečné koncentrace 5% v/V po autoklávování.
5. nalijte chlazený Mannitolový solný Agar do sterilních Petriho nádobí a nechte vychladnout na pokojovou teplotu.,w zone Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth

   Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)

   1. It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
   2. používá se také k výčtu stafylokoků v potravinách a mléčných výrobcích.
   3. toto médium je také součástí bakteriologické analytické příručky pro testování kosmetiky.
   4. používá se také při bakteriologickém vyšetření bazénové vody, lázní a pitné vody pomocí membránové filtrace.

   Omezení Mannitol Salt Agar (MSA)

   1. Několik Staphylococcus jiných druhů než aureus jsou mannitol pozitivní a vytvářejí žluté kolonie obklopené žlutými zónami na tomto médiu (např.. S., capitis, s. xylosus, s.cohnii, s. sciuri, s. simulans a další druhy). Proto jsou pro identifikaci s.aureus nebo jiných druhů nezbytné další biochemické testy.
   2. Většina organismů jiných než stafylokoky jsou inhibován vysokou koncentrací solí nalezené v Mannitol Salt Agar s výjimkou některých halophillic mořských živočichů.
   3. několik kmenů Staphylococcus aureus může vykazovat opožděné kvašení mannitolu. Negativní desky by měly být znovu inkubovány přes noc před vyřazením.
   4. předpokládaný Staphylococcus aureus musí být potvrzen koagulázovým testem.,