Zuletzt Aktualisiert am 4. Februar 2021 von Sagar Aryal
Einführung von Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar (MSA) wird als selektives Differenzial-medium zur Isolierung und Identifizierung von Staphylococcus aureus aus klinischen und nicht-klinischen Proben., Es wird für den Nachweis und die Aufzählung von Koagulase-positiven Staphylokokken in Milch, Lebensmitteln und anderen Proben empfohlen und fördert das Wachstum einer Gruppe bestimmter Bakterien, während es das Wachstum anderer hemmt.
Prinzip von Mannitol Salz Agar (MSA)
Mannitol Salz Agar enthält rindfleisch extrakt und proteose pepton, die macht es sehr nahrhaft, wie sie bieten wesentliche wachstum faktoren und spur nährstoffe wie stickstoff, vitamine, mineralien und aminosäuren ätherisches für wachstum. Das medium enthält 7.,5% Natriumchloridkonzentration, die zur teilweisen oder vollständigen Hemmung anderer bakterieller Organismen als Staphylokokken führt. Mannitol ist die fermentierbare Kohlenhydratquelle, deren Fermentation zur Säureproduktion führt. Staphylococcus aureus wächst auf diesem Medium und fermentiert Mannitol, um gelbe Kolonien zu produzieren. Die meisten Koagulase-negativen Staphylokokken-und Mikrokokkenarten fermentieren Mannitol nicht und wachsen als kleine rote Kolonien. Die Farbe der Kolonien und des Mediums ist auf die Reaktivität von Phenolrot (Indikator) auf den pH-Wert des Mediums zurückzuführen. Phenolrot ist bei pH 8 rot.,4 und Phenolrot ist gelb bei pH 6.8. Agar ist das verfestigende agent. Zusätzlich kann 5% v / v Eigelbemulsion zu einem Medium zugegeben werden, das den Nachweis der Lipase-Aktivität von Staphylokokken zusammen mit der Mannitolfermentation ermöglicht. Das Salz löscht die Eigelb-Emulsion und Lipase-Produktion wird als gelbe undurchsichtige Zone um die Kolonien nachgewiesen.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
Ingredients | Gms/Litre |
Proteose peptone | 10.0 |
Sodium chloride | 75.0 |
D- mannitol | 10.,0 |
Beef extract | 1.0 |
Phenol red | 0.025 |
Agar | 15.0 |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.
Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)
- Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
- Boil to dissolve the medium completely.,
- Sterilisieren durch Autoklavieren bei 15 lbs. Druck (121°C) für 15 Minuten.
- Auf Wunsch kann sterile Eigelbemulsion (E7899) zu einer Endkonzentration von 5% v/v nach dem Autoklavieren zugegeben werden.
- Gekühlten Mannitol Salz Agar in sterile Petrischalen gießen und auf Raumtemperatur abkühlen lassen.,w zone
Staphylococcus epidermidis Pink or Red colonies Micrococci Red colonies Escherichia coli No growth Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)
- It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
- Es wird auch zur Aufzählung von Staphylokokken in Lebensmitteln und Milchprodukten verwendet.
- Dieses Medium ist auch im Bakteriologischen Analysehandbuch für kosmetische Tests enthalten.
- Es wird auch bei der bakteriologischen Untersuchung von Schwimmbadwasser, Spas und Trinkwasser mittels Membranfiltration eingesetzt.
Einschränkungen von Mannitolsalz-Agar (MSA)
- Mehrere Staphylococcus-Arten außer Aureus sind Mannitol-positiv und produzieren gelbe Kolonien, die von gelben Zonen auf diesem Medium umgeben sind (z. B. S., capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans und andere Arten). Daher sind weitere biochemische Tests zur Identifizierung von S. aureus oder anderen Arten erforderlich.
- Die meisten anderen Organismen als Staphylokokken werden durch die hohe Salzkonzentration im Mannitolsalz-Agar gehemmt, mit Ausnahme einiger halophiller Meeresorganismen.
- Einige Stämme von Staphylococcus aureus können eine verzögerte Fermentation von Mannitol aufweisen. Negative Platten sollten vor dem Abwerfen über Nacht erneut inkubiert werden.
- Der mutmaßliche Staphylococcus aureus muss mit einem Koagulase-Test bestätigt werden.,