Tanulási Célok
- Azonosítására, illetve leírni, kultúra, média, a baktériumok növekedését, beleértve a példák mind-cél a média, dúsított, szelektív, differenciált, meghatározott, valamint a dúsítás média
a tanulmány A mikroorganizmusok nagyban megkönnyíti, ha tudjuk, hogy a kultúra őket, hogy folyton szaporodó populációkban él, laboratóriumi körülmények között., Számos mikroorganizmus tenyésztése kihívást jelent a rendkívül specifikus táplálkozási és környezetvédelmi követelmények, valamint a különböző fajok közötti követelmények sokfélesége miatt.
táplálkozási követelmények
a baktériumok termesztésére rendelkezésre álló adathordozók száma jelentős. Egyes médiumokat általános célú közegnek tekintünk, és számos organizmus növekedését támogatjuk. Az általános célú közeg kiváló példája a triptikus szójaleves (TSB). A baktériumok azonosításához speciális tápanyagokat használnak, amelyeket színezékekkel, pH-mutatókkal vagy antibiotikumokkal egészítenek ki., Az egyik típus, a dúsított közeg növekedési faktorokat, vitaminokat és egyéb alapvető tápanyagokat tartalmaz, amelyek elősegítik az érzékeny organizmusok, olyan szervezetek növekedését, amelyek nem képesek bizonyos tápanyagokat előállítani, és megkövetelik, hogy azokat a tápközeghez adják. Ha egy közeg teljes kémiai összetétele ismert, akkor kémiailag meghatározott közegnek nevezik. Például EZ közegben minden egyes kémiai komponenst azonosítanak, és mindegyik pontos mennyisége ismert. Az élesztők, húsok vagy növények kivonatait és emésztését tartalmazó komplex közegben a közeg pontos kémiai összetétele nem ismert., Az egyes komponensek mennyisége meghatározatlan és változó. A tápoldat, a triptikus szójaleves és az agyi szívinfúzió mind példák a komplex közegekre.
1.ábra. Ezen a MacConkey agar lemezen a laktóz-fermentor E. coli kolóniák világos rózsaszínűek. A Serratia marcescens, amely nem erjeszti a laktózt, krémszínű csíkot képez a barnító közegen., (credit: American Society for Microbiology)
a nem kívánt mikroorganizmusok növekedését gátló és az érdeklődő szervezet növekedését tápanyagellátással és a verseny csökkentésével támogató médiát szelektív közegnek nevezzük. A szelektív közeg példája a MacConkey agar. Epesókat és kristály ibolyát tartalmaz, amelyek számos gram-pozitív baktérium növekedését zavarják, és elősegítik a gram-negatív baktériumok, különösen az Enterobacteriaceae növekedését. Ezeket a fajokat általában enteriőröknek nevezik, a bélben élnek, és az epesók jelenlétéhez igazodnak., A dúsító kultúrák elősegítik a kívánt mikroorganizmus preferenciális növekedését, amely az inokulumban jelen lévő organizmusok töredékét képviseli. Például, ha olyan baktériumokat akarunk izolálni, amelyek lebontják a nyersolajat, a szénhidrogén-klasztikus baktériumokat, a szekvenciális szubkulturálás olyan közegben, amely csak nyersolaj formájában biztosítja a szenet, gazdagítja a tenyészeteket olajevő baktériumokkal. A differenciál közeg megkönnyíti a különböző baktériumok kolóniáinak megkülönböztetését a kolóniák színének vagy a közeg színének megváltozásával., A színváltozások olyan végtermékek eredménye, amelyeket a bakteriális enzimek kölcsönhatása hoz létre a tápközegben lévő differenciál szubsztrátokkal, vagy hemolitikus reakciók esetén a vörösvértestek lízisét a közegben. Az 1. ábrán a laktóz differenciál erjedése megfigyelhető a MacConkey agar-on. A laktóz-fermentorok savat termelnek, amely az erős fermentorok közegét és kolóniáit forró rózsaszínűvé teszi. A táptalajt a semleges piros pH-jelzővel egészítik ki, amely alacsony pH-n forró rózsaszínűvé válik., A szelektív és differenciált közeg kombinálható és fontos szerepet játszhat a baktériumok biokémiai módszerekkel történő azonosításában.
Gondolj bele
- Megkülönböztesd a komplex és kémiailag meghatározott közegeket.
- megkülönböztesse a szelektív és gazdagító közegeket.
az év végi piknik
a mikrobiológiai osztály májusban ünnepli a tanév végét azzal, hogy hagyományos pikniket tart a zölden., A beszédek pár órára elhúzódnak, de végül minden kar és diák beleáshatja magát az ételbe: csirkesaláta, paradicsom, hagyma, saláta és pudingpite. Este, az egész osztály, kivéve a két vegetáriánus diákok, akik nem eszik a csirke saláta, sújtja hányinger, hányás, öklendezés, hasi görcsök. Több személy panaszkodik a hasmenésről. Egy beteg sokk jeleit mutatja (alacsony vérnyomás). Vér – és székletmintákat gyűjtenek a betegektől, és elemzik az étkezéskor felszolgált összes ételt.,
a baktériumok gastroenteritist (a gyomor-és bélrendszer gyulladását) okozhatnak a gazdaszervezetben történő kolonizálással és replikációval, amely fertőzésnek tekinthető, vagy toxinok kiválasztásával, ami mérgezésnek tekinthető. A fertőzések jelei és tünetei jellemzően késnek, míg a mérgezés órákon belül jelentkezik, ahogy az a piknik után történt.
a betegektől származó vérminták nem mutattak bakteriális fertőzés jeleit, ami arra utal, hogy ez mérgezés volt., Mivel a mérgezés a szekretált toxinok miatt következik be, a baktériumokat általában nem észlelik vér-vagy székletmintákban. A MacConkey agar és szorbit-MacConkey agar lemezeket és xylose-lizin-deoxycholate (XLD) lemezeket székletmintákkal oltották be, és nem mutattak ki szokatlanul színes kolóniákat, és nem figyeltek meg fekete kolóniákat vagy fehér kolóniákat az XLD-n. A MacConkey agar összes laktóz fermentálója szintén erjeszti a szorbitot. Ezek az eredmények kizárták az élelmiszer-eredetű betegségek gyakori ágenseit: E. coli, Salmonella spp., és Shigella spp.
2.ábra., Gram-pozitív cocci klaszterekben. (credit: Centers for Disease Control and Prevention)
elemzése a csirke saláta kiderült abnormális számú gram-pozitív cocci rendezett klaszterek (2.ábra). A Gram-pozitív cocci kultúrája hidrogén-peroxiddal keverve buborékokat szabadít fel. A kultúra 24 órás inkubáció után mannit só agar sárga lett.
minden vizsgálat a Staphylococcus aureusra utal, mint a toxint kiválasztó szervezetre. A salátából származó minták Gram-pozitív cocci baktériumok jelenlétét mutatták klaszterekben. A kolóniák pozitívak voltak a kataláz számára., A baktériumok a mannitol só agar fermentáló manniton nőttek, amint azt a közeg sárgájára való áttérés is mutatja. A mannit só agar pH-mutatója fenolvörös, amely sárgára változik, amikor a tápközeget az erjedési termékek savanyítják.
az S. aureus által kiválasztott toxinról ismert, hogy súlyos gastroenteritist okoz. A szervezet valószínűleg az ételkészítés során került a salátába, és megsokszorozódott, míg a salátát meleg környezetben tartották a beszédek alatt.,
- milyen egyéb tényezők járultak hozzá az S. aureus gyors növekedéséhez a csirkesalátában?
- miért nem gátolná S. aureust a csirke salátában lévő só jelenléte?
kulcsfogalmak és összefoglaló
- a kémiailag meghatározott közegek csak kémiailag ismert komponenseket tartalmaznak.
- a szelektív média elősegíti egyes mikroorganizmusok növekedését, miközben másokat gátol.,
- a dúsított közeg hozzáadott alapvető tápanyagokat tartalmaz egy adott szervezetnek növekednie kell
- a differenciál közeg segít megkülönböztetni a baktériumokat a telepek színétől vagy a közeg változásától.
feleletválasztós
az EMB agar a patogén baktériumok azonosításában és izolálásában használt közeg. Emésztett húsfehérjéket tartalmaz szerves tápanyagok forrásaként. Két indikátorfesték, az eozin és a metilénkék gátolják a gram-pozitív baktériumok növekedését, és különbséget tesznek a laktózt erjesztő és a nemlaktózt erjesztő szervezetek között., A laktóz fermentorok fémes zöld vagy mély lila kolóniákat alkotnak, míg a nem lactose fermentorok teljesen színtelen kolóniákat képeznek. EMB agar egy példa, amely a következő?
- csak szelektív közeg
- csak differenciális közeg
- szelektív közeg és kémiailag meghatározott közeg
- szelektív közeg, differenciált közeg és összetett közeg
a Haemophilus influenzae-t csokoládé agaron kell termeszteni, amely hővel kezelt vér agar, hogy a közegben növekedési faktorokat szabadítson fel. A H. influenzae leírása:_______.
- an acidophile
- an obligate anaerobe
a thermophile
töltse ki az üres
vér agar tartalmaz sok meghatározatlan tápanyagot, támogatja a növekedést a nagyszámú baktérium, és lehetővé teszi a differenciálódást a baktériumok szerint hemolízis (vér lebontása). A médium ________ és ________.
a Rogosa agar élesztőkivonatot tartalmaz. A pH-érték 5,2-re van beállítva, ami sok mikroorganizmus növekedését gátolja, azonban minden Telep hasonló. A médium ________ és ________.
gondolj bele
mi a fő különbség a dúsítási kultúra és a szelektív kultúra között?
kritikus gondolkodás
Haemophilus, influenzae nő a legjobban 35-37 °C-on ~5% CO2 (vagy egy gyertya-jar) igényel hemin (X factor) és nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD, más néven V factor) a növekedés. Az ebben a fejezetben tanult szókincs használatával írja le a H. influenzae-t.
- Betegségmegelőzési és Megelőzési Központok, Egészségügyi Világszervezet., “CDC laboratóriumi módszerek a Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae és Haemophilus influenza okozta agyhártyagyulladás diagnosztizálására. WHO kézikönyv, 2. kiadás.” 2011. http://www.cdc.gov/meningitis/lab-manual/full-manual.pdf ↵