Aspirin thrombocyta-gátló hatása
jóval azelőtt, hogy a klinikusok végzett klinikai vizsgálatok, hogy tesztelték Dr. Craven megfigyeléseit, klinikus-kutatók és az alapvető tudósok kérdéseket tettek fel az alapvető mechanizmusok vérlemezke aktiválás és a vérzéses kapcsolatos rendellenességek vérlemezke hibák. 1950-re megállapítást nyert, hogy az aszpirin nagy dózisai meghosszabbították a protrombin időt22-24-ezt a tényt Craven is megjegyezte.,20 azonban még a protrombinidőre gyakorolt túl alacsony dózisok is elegendőnek bizonyultak a koszorúér-trombózis megelőzésére, és ez a zavarodott Craven. Mert aszpirin járó vérzést, majd szokatlanul nagy dózisú, tartós prothrombin idő, sok orvos az 1940-es években volt felírása aszpirin együtt K-vitamin (még a kombinált tabletta formájában), keretében a téves feltételezés, hogy további K vitamin talán valahogy kompenzálja a fokozott vérzés. Még Craven is ezt a helytelen feltételezést tette.,Az alapkutatók és a klinikus-kutatók 19 későbbi tanulmánya foglalkozna ezekkel és más alapvető kérdésekkel.
az ateroszklerózis és a miokardiális infarktus mind gyulladásos, mind trombotikus folyamatok eredménye. A 20. század második felében az emberiség nagymértékben továbbfejlesztette e folyamatok megértését. A hemosztázist és a gyulladást egykor elkülönültnek tartották, de most már tudjuk, hogy ez a 2 folyamat gyakran kapcsolódik egymáshoz. Gyulladás vagy sérülés során a leukociták gördülnek végig, és tapadnak az erek falát összekötő aktivált endothel sejtekhez., A leukocita gördülését elsősorban a szelektinek és ligandumaik közvetítik, 25, míg a szilárd tapadást az integrinek és ligandumaik közvetítik.26 erősen tapadó leukociták ezt követően átterjednek az endotheliumon. A leukocitákkal ellentétben a tapadó vérlemezkék a véredény lumenében maradnak, és továbbra is felhalmozódnak a lumen közepe felé. Ha az erek falát sérült meg súlyosan, ahhoz, hogy denude az endothelium, a vérlemezkék csatolni subendothelial von Willebrand-faktort, kollagén -, áramlik a vérlemezkék heveder, hogy a már tapadó, aktív vérlemezkék.,27
ismert, hogy számos inger, köztük a trombin, az adenozin-difoszfát (ADP) és a kollagén vérlemezke-aktivációt, terjedést és aggregációt okoz. Az adenozin-difoszfátot a vérlemezkék sűrű granulátumában tárolják, és sejtaktiváláskor szabadul fel, de csak szerény reverzibilis aggregációt okoz. Mindazonáltal az ADP fontos szerepet játszik a vérlemezkék alakváltozásához vezető jelek elindításában és a tromboxán A2 szintézisében, amely a vérlemezkék hatékony aktiválója., Amikor a vérlemezke aktiválódik és sűrű granulátumai felszabadítják azok tartalmát, az ADP ugyanazon és a szomszédos vérlemezkék receptoraihoz kötődik, akárcsak a thromboxane A2 a receptorához. Az adenozin-difoszfát felerősíti a vérlemezke válaszát más agonistákra. Ez az adhéziós kaszkád nagy vérlemezke-aggregátumok kialakulásához vezet, amelyek mind prokoaguláns, mind proinflammatorikusak. A kapott trombus könnyen elzárhatja a már szűkült ateroszklerotikus koszorúér lumenjét, ezáltal miokardiális infarktust okozva.,28,29
sok tudós hozzájárult az aszpirin és a thrombocyta funkció jelenlegi megértéséhez, és nem célszerű mindegyik történetüket elmondani. Ehelyett ez a tanulmány néhány olyan kutatóra összpontosít, akiknek felfedezései elősegítették a klinikai érdeklődés élénkítését az aszpirin kardiovaszkuláris események megelőzésére. Az 1960-as évek végén Dr. Harvey J. Weiss30,31 megkérdezte a következő fontos kérdést: “az aszpirin befolyásolja-e a vérlemezkéket?”Weiss olyan betegeket tanulmányozott, akiknél a 3-as vérlemezke-faktor hiány volt, olyan rendellenesség, amelyben a vérlemezkék az ADP hibás felszabadulását mutatják.,8 egyidejűleg Dr. Armand Quick29 megvizsgálta az aszpirin vérzésre gyakorolt hatását, megállapítva, hogy az aszpirin nagyon alacsony dózisai meghosszabbították a vérzési időt, annak ellenére, hogy az alacsony dózisok nem befolyásolták a protrombin időt. Quick azt is megállapította, hogy az aszpirin aránytalanul nagy hatással volt a Von Willebrand-betegségben szenvedő betegek vérzési idejére, és feltételezte, hogy az alacsony dózisú aszpirin meghosszabbíthatja a vérzési időt normál betegeknél a von Willebrand-kórhoz hasonló hiba létrehozásával.,29 Weiss elmélete szerint a vérzési idő aszpirinnel összefüggő meghosszabbodása hibás vérlemezke-aggregáció következménye lehet az ADP csökkent felszabadulása miatt. Számos tanulmányban megjelent 30-32 eredményei azt mutatták,hogy az aszpirin rontja mind az ADP felszabadulását, mind a másodlagos ADP-függő vérlemezke-aggregációt (ábra. 3). Figyelemre méltó, hogy Weiss azt is megállapította, hogy a nátrium-szalicilát nem volt ilyen hatása ADP felszabadulás vagy vérlemezke-aggregáció, ami azt sugallta, hogy az aszpirin vérlemezke-gátló aktivitás függ az acetil-módosítás, amely megkülönbözteti az “aszpirin” a szalicilsav., Más csoportok megerősítették ezt a különbséget a szalicilsav és az aszpirin között.29,33 Weiss számolt be, hogy az aszpirin hatása a vérlemezkék gyors és visszafordíthatatlan, gátolja a vérlemezke-aggregáció időtartama alatt a vérlemezke életét. Számos más csoport megállapításaival együtt Dr. Weiss felfedezése kulcsfontosságú lépés volt annak a mechanizmusnak a megértésében, amellyel az alacsony dózisú aszpirin megakadályozhatja a koszorúér-és agyi trombózist. Például James mustár, Marian Packham és Geoffrey Evans és kollégáik is kimutatták, hogy az aszpirin gátolhatja a vérlemezkék aggregációját., Bár ez a munka azt mutatta, hogy az aszpirin vérlemezke-gátló hatása van, nem tárta fel azt a specifikus molekuláris mechanizmust, amellyel az aszpirin ezeket a hatásokat kifejtette. A szalicilsav és az aszpirin (acetilszalicilsav) hatásainak különbségei arra utaltak, hogy az acetilcsoport valamilyen módon részt vett. Az egyik laboratórium arról számolt be, hogy az aszpirin-kezelés után szelektíven találtak egy acetilszalicilsavból származó radioizotópos acetilcsoportot a vérlemezkékben, míg a radioizotópos karboxilcsoportot nem építették be a vérlemezkékbe.37
ábra., 3 a vérlemezke trombusképződés gátlása aszpirinnel. A citrátvért az artériás nyírási sebességgel a de-endothelizált nyúl aorta felett perfundálták az aszpirin bevétele előtt, B) 2, 5 óra, 0, 9 g aszpirin bevétele után.32 a képeket fénymikroszkóppal szerezték be. A fekete sáv 10 µm.
(A Weiss HJ, Tschopp TB, Baumgartner HR engedélyével újranyomtatva. A von Willebrand-kórral való összehasonlítás. N Engl J Med 1975;293: 619-23., Copyright © 1975, Massachusetts Medical Society. Minden jog fenntartva.)
míg Harvey Weiss az aszpirin vérlemezke-aggregációra gyakorolt hatását vizsgálta, mások kísérleteket végeztek a prosztaglandinok funkcióinak és az aszpirin felszabadulásra gyakorolt hatásának in vivo tanulmányozására. Weiss már megoldotta a puzzle nagy részét, miután kimutatta, hogy az aszpirin gátolta a vérlemezke-aggregációt. Majdnem egy időben Priscilla Piper és Sir John Vane prosztaglandin kutatók azt kérdezték, hogy az aszpirin befolyásolhatja-e a prosztaglandinok bioszintézisét., Az 1960-as évek elején Vane kifejlesztett egy módszert a különböző anyagok termelésének meghatározására izolált szerv perfúzió útján, amelyet cascade superfusion bioassay-nek nevezett.38 ebben a vizsgálatban vér-vagy mesterséges sóoldatot perfúzáltak az izolált vizsgálati szöveteken, és különböző vizsgálati anyagokat is bevezettek. Vane tett számos újítást a korábbi bioassay technikák, mint például superfusing egy szerv vérrel egy állat véna vagy artéria, majd visszatér a vér egy nagy véna. 1982-ben Vane elnyerte a Nobel-díjat a fiziológiában vagy az orvostudományban az ehhez a területhez való hozzájárulásáért., Ezek az újítások létfontosságúnak bizonyulnának az aszpirin molekuláris szintű hatásainak megértéséhez. Vane megjegyezte, hogy az “elem instantaneity fontos szempont cascade superfusion bioassay, hogy érzékeli a biológiai aktivitását kémiailag instabil vegyületek, amelyek aktivitása egyébként elvész az extrakciós folyamat.”39 ezzel a megközelítéssel Vane és Piper tanulmányozta az anafilaxia során felszabaduló anyagokat.40 felfedezték a prosztaglandinok felszabadulását és a “nyúl aorta” nevű molekulát (RCS, később átnevezték tromboxán A2)., Az RCS-t rendkívül instabilnak találták, és ez a tény döntő jelentőségű volt későbbi felfedezéseik szempontjából: néhány perces késés elegendő volt ahhoz, hogy megakadályozza az RCS hatását a vizsgálati szövetre. A tengerimalac tüdejét használó vizsgálatokban azt találták, hogy az aszpirin blokkolta az RCS és a prosztaglandinok felszabadulását is. Vane leírta tapasztalatait:
miközben a hétvégén áttekintő papírt írtam, beleértve néhány ilyen kísérlet eredményeit is, eszembe jutott egy gondolat, hogy talán korábban nyilvánvalónak kellett volna lennie., Mindezen kísérletekben (és sok más munkás esetében) a prosztaglandinok” felszabadulásának ” valójában a prosztaglandinok friss szintézisének kell lennie. Vagyis a prosztaglandin kimenet ezekben a kísérletekben, bár nagyon alacsony, még mindig sokkal magasabb volt, mint a szövetek” kezdeti hormontartalma. Nyilvánvaló tehát, hogy a prosztaglandinokat felszabadító különféle ingerek, mechanikai és kémiai anyagok valójában “bekapcsolták” ezeknek a vegyületeknek a szintézisét. Logikus következménye az volt, hogy az aszpirin valószínűleg blokkolja a prosztaglandinok szintézisét.,39
Vane tesztelte hipotézisét azáltal, hogy aszpirint vezetett be egy olyan kísérletben, amely a prosztaglandinok előállítására ismert sejt homogenizátum felülúszóját használta. Hipotézise helyesnek bizonyult, mivel az aszpirin dózisfüggő módon gátolta az RCS és prosztaglandinok képződését.41,42 Smith és Willis43 ugyanezt a hipotézist tesztelte azoknál a betegeknél, akik 600 mg aszpirint szedtek, majd a vérlemezkéket izolálták és trombinnal stimulálták. Megállapították, hogy a prosztaglandin szintézist kifejezetten gátolta az aszpirin,43 amely összhangban volt Vane jelentésével., Az enzim, amelyet az aszpirin gátolja-később kiderült, hogy ciklooxigenáz-1 (COX-1) (ábra. 4) – kulcsszerepet játszik a prosztaglandinok és a tromboxán A2 szintézisében. Együttesen, a munka, a kutatók feltárták, hogy az aszpirin”s hatása a thrombocyta-aggregációt eredménye gátolja a COX-1 (ezáltal csökkentve a tromboxán-A2-szintézis), valamint gátolja a válasz, hogy a tromboxán (ami függ ADP az erősítés). A Roth és az associates44 azt mutatta, hogy az aszpirin visszafordíthatatlanul gátolja a COX-1-et egy szerinmaradék acetilezésével, ezáltal megakadályozza az arachidonsav kötődését., A vérlemezkékben a COX-1 irreverzibilis gátlása különösen fontos, mivel minden új enzim szintézise minimális ezekben az anukleáris sejtekben. Ez a jellemző a vérlemezkék vezet mélyebb és hosszabb gátlása vérlemezke funkció, összehasonlítva az aszpirin hatása a sejtekre, amelyek magukban foglalják a magok. Ezeknek és más tudósoknak a hozzájárulása valószínűleg újra felkeltette az aszpirin iránti érdeklődést a kardiovaszkuláris események megelőzésére, ami az 1. klinikai vizsgálatokhoz vezetett, amelyek közvetlenül tesztelték a Craven állításait.
ábra., 4 Synthetic pathway for prostaglandins and thromboxane A2. Aspirin inhibits cyclooxygenase-1, which is necessary for the synthesis of thromboxane A2 and prostaglandins.
COX = cyclooxygenase; PGG2 = prostaglandin G2; PGH2 = prostaglandin H2