L’ibridazione in situ a fluorescenza (FISH) rileva la presenza / assenza o posizione di un gene o cromosoma specifico a una risoluzione di ~ 100 kb. Gli studi sui PESCI sono utili per dimostrare micro delezioni o duplicazioni e per dimostrare la presenza di riarrangiamenti genici. FISH permette anche una rapida individuazione di monosomie, trisomie e anomalie numeriche dei cromosomi sessuali.
Quando?,
- Per confermare l’anomalia genica o cromosomica specifica del paziente/campione quando l’obiettivo è noto
- Per identificare microdelezioni e duplicazioni quando l’obiettivo è noto
- Per uno screening più rapido del mosaicismo se si sospetta una specifica aneuploidia cromosomica
- Mappatura del transgene
Come?
FISH comporta l’ibridazione di una sequenza di DNA bersaglio etichettata con un colorante fluorescente (chiamato sonda). Le sonde sono attualmente disponibili presso diversi fornitori o possono essere prodotte nel nostro laboratorio. Le sonde possono essere specifiche per sequenze uniche (ad es.,, Gene ELN per la sindrome di Williams sul cromosoma 7), o DNA ripetitivo (ad esempio, sequenze centromere alfa-satellite), o vernici cromosomiche (ad esempio, sequenze che comprendono il cromosoma 7). L’analisi del PESCE può essere eseguita utilizzando una o più sonde, a condizione che le etichette fluorescenti per ciascuna sonda siano diverse e che il microscopio abbia il filtro appropriato per rilevare l’etichetta. Il PESCE può essere eseguito su cellule metafase raccolte, cellule interfase o su preparati cellulari diretti. Un’analisi FISH include l’esame di 20 cellule metafase o 100 cellule interfase., Sono forniti fotomicrografi a fluorescenza a colori di risultati rappresentativi dei PESCI.
Per ulteriori informazioni su come il pesce viene utilizzato per rilevare anomalie cromosomiche, si prega di visitare Pesca per anomalie cromosomiche.