ウェビナー Q&A–C57BL/6マウスへのあなたのガイド

あなたは博士フィリップDubéの最近のウェビナー、世界で最も重要なマウス-C57BL/6マウスへのあなたのガイドを欠場しましたか? 彼のプレゼンテーションでは、c57bl/6サブストレイン間の遺伝的多様性、GEMモデルへの影響、および代謝、免疫学、腫瘍学および行動の研究におけるC57BL/6マウスの有用性について検討しました。
時間の制約のために、研究者が彼のQに提出した質問の多く&セッションは未回答になりました。,

  • Q:Taconic Biosciencesは現在、いくつの異なるC57BL/6サブストレインを提供していますか?

フィリップ-デュベ博士(PD):Taconicは二つの異なるC57BL/6サブストレイン、C57BL/6NTacとC57BL/6JBomTacを提供しています。

  • Q:C57bl/6NTacはジャクソン研究所のC57BL/6NJと同じですか?

PD:タコニックのC57BL/6NTacは遺伝的に類似しているが、C57BL/6NJ株と同一ではない。
どちらも、かつて国立衛生研究所(NIH)動物遺伝資源で維持されていたC57BL/6N胚から派生しています。, タコニックは1991年にこの株を受け取り、ジャクソン研究所は1997年に彼らを受け取った。
Taconicは、すべての近交系マウス株の遺伝的安定性を凍結保存によって維持し、C57BL/6NTacがNIHで維持されている元のC57BL/6N系統とできるだけ類似していることを保証します。

  • Q:遺伝的背景はマイクロバイオームプロファイルと比較してどのように重要ですか?

PD:C57bl/6サブストレイン間の遺伝的変異は、複数の表現型の違いに貢献しています。, しかしながら、マイクロバイオームは、マウス株の複数の特徴、特に免疫機能および代謝機能を決定する上で同様に重要な役割を有することができる。
マウスから調達さまざまなベンダーのある場所と異なる同じベンダーがより大きく異なる大阪大学総長平野俊夫からのデータ。 機能的影響を有する既知の共生微生物の具体例としては、分裂糸状細菌(SFB)およびLactobacillus reuteri1,2が挙げられる。

  • Q:遺伝的ドリフトを避けるために、どのくらいの頻度でコロニーをバッククロスする必要がありますか?,

PD:野生型C57BL/6マウスのコロニーを維持している場合は、少なくとも四世代ごとに新鮮なストックに置き換えることをお勧めします。 定義されたC57BL/6背景に遺伝子操作されたマウスのコロニーを使用する場合は、四から十世代ごとにバッククロッシングを検討してください。
バッククロッシングの一世代はゲノムの半分しか置き換えられないので、これを少なくするのではなく、より頻繁に行うことが推奨されます。
バッククロッシングするときは、ラインの背景と同じ定義された近交系のストックを使用するように注意してください。, 不適切なC57BL/6サブストレインを使用すると、将来の研究に影響を与える可能性があります3,4.
系統の遺伝的背景が不明な場合は、SNP検査を実施する必要があります(下記参照)。 より良いオプションは、あなたのラインから胚(または精子)を凍結保存し、十世代ごとにrederived動物と完全に置き換えることです。 これへの加えられた利点は不慮の状況(病気、偶然のmismating、設備問題、自然災害、等)の場合にはあなたのコロニーのためのバックアップを持っていることの保証).

  • Q:サブストレインを検証するための実験的なアプローチは何ですか?,

PD:一塩基多型(SNP)パネルテストは、あなたのマウス株の遺伝的背景を決定するための簡単で経済的な方法です。
サブストレインの背景は、C57BL/6株を区別するために設計されたSNPパネルを用いて容易に同定することができ、例えばマウスB6SNPパネルからTaconic(合計で九十から六Snp)を区別することができる。 このパネルには、C57BL/6NTacサブストレインとC57BL/6Jサブストレインの間で異なる九十から四Snpが含まれています。,
ただし、このパネルはC57BL/6Nサブストレイン内の違いにはあまり敏感ではなく、C57BL/6NJを他のC57BL/6Nサブストレインと区別するsnpのみを含 対象となるC57BL/6SNPパネルを使用する前に、あなたの株が純粋なC57BL/6バックグラウンド上にあり、他の株(例えば129S6/Sv、FVBまたはBALB/c)からの遺伝 全体ひずみ成分で判断できより包括的な遺伝子多型パネルです。

  • Q:どの遺伝子が異なるC57BL/6サブストレイン間で表現型の違いを引き起こしているかをどのように判断できますか?,

PD:SNPアレイと全ゲノムシークエンシングと組み合わせて、異なるC57BL/6サブストレイン間の遺伝的交雑の連鎖解析は、与えられた表現型のための推定原因遺伝子を同定するのに役立つかもしれません。 しかし、C57BL/6サブストレイン間の連鎖解析のためのマーカーの数が限られているため、このアプローチは困難です。
遺伝的変異体に対する機能的な結果の確認は、正式には、定義された遺伝的背景における標的遺伝子編集を必要とする。, 例えば、c57bl/6NHsdサブストレインにおける異常なB細胞の発達は、このmanner3におけるDock2m1Hsd変異体に起因していた。 注意はmicrobiomeの影響のような緊張間の相違のための非遺伝的要因を、除外するために取られるべきです。

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  • 世界で最も重要なマウス-C57bl/6マウスへのあなたのガイド
  • Q:c57bl/6マウスの

PD:ジェンダーは大きな影響を与えることができます。, 明らかな体重およびホルモン性の相違は別として、C57BL/6の男性にC57BL/6の女性と比較される異なった行動および新陳代謝の特性があります。
研究デザインでは常に性別を考慮する必要があります。 性別は重要な生物学的変数であり、研究に含める性別の選択は科学的に正当化できるべきである。 例えば、2015年の時点で、NIHは生物医学研究における動物を含むすべての助成申請において性別の選択を正当化する必要があります。

  • Q:雄C57BL/6マウスの攻撃性と戦闘行動をどのように減らすことができますか?,

PD:C57BL/6男性は、年齢やストレスの多い状況にさらされるにつれて、ますます積極的になることがあります。 C57BL/6男性は階層的であり、支配的な男性は複数のマウスを持つケージで発生する可能性があります。 若い頃から他の男性と一緒に収容された場合、または同腹者として、侵略の可能性は最小限に抑えられます。
思春期後のC57BL/6男性と他の不慣れな男性との共同ハウスはしないことをお勧めします。 スタッドの男性は、他の男性と一緒に収容すべきではなく、複数の男性は、任意の女性(複数可)と一緒に収容すべきではありません。,
ストレスを引き起こす状況(手続き、不慣れな世話人、病気など))は、侵略の可能性を高める傾向があります。 濃縮装置を提供することは積極的な行動を減らすかもしれない;これらは入れ子材料、羊飼いの小屋、咀嚼の棒、管、等を含んでいる。

  • Q:c57bl/6マウスはなぜ潰瘍性皮膚炎を発症し、どのように予防および/または治療することができますか?

PD:すべてのC57BL/6サブストレインは皮膚炎を発症する傾向があります。 遺伝的原因は不明ですが、これには強い環境成分があります。,
皮膚炎の発生は30%と70%間の一定した温度そして相対湿度の安定した環境の維持によって最小になるかもしれません。
いったん皮膚炎が現れると、これは歴史的に治療が困難でした。 但し、新しく、非常に有効な管理選択は治療する間、条件の負傷そして悪化を防ぐために影響を受けたマウスの後部足指の爪を切ることです1。 局所軟膏および抗生物質はまた、治癒中の感染を予防するのに役立つかもしれないが、一般に単独では有効ではない。,

  • Q:Purina5015chowのようなブリーダーダイエットでは、C57BL/6NTacマウスが肥満になり、メタボリックシンドロームを示すでしょうか?

PD:高エネルギーブリーダーダイエットは、産後および継続的に繁殖する女性をサポートするために脂肪を増加させて処方されています。 典型的には、これらは重量で約11%の脂肪を有し、標準的なチャウでは5-6%と比較している。
C57BL/6NTacマウスは、高脂肪食を与えると、食事誘発性肥満およびインスリン抵抗性を発症する傾向がある。 11%の脂肪質の食事療法で維持されたとき高められたadiposityは意外ではないです。
タコニックのスタンダードチョウはNIH31Mフォーミュラである。,

  • Q:代謝研究に使用する特定のC57BL/6サブストレインを選択する簡単な方法はありますか?

PD:c57bl/6Nサブストレインは代謝研究に推奨されることが多いが、特定のアプリケーションに最適なサブストレインを選択する簡単な方法はない。
代謝研究におけるマウスの性能は、遺伝的要因だけでなく、その固有のマイクロバイオームプロファイルにも依存する。 マウスのマイクロバイオームは、その起源と飼育プロトコルに基づいて異なります。,
最良の推奨事項は、特定の場所からソースされた特定のサブストレインを使用して、検証研究に基づいて最適なモデルを選択することです。

  • Q:C57BL/6マウスはストレス誘導プロトコルにどれだけうまく働いていますか?

PD:C57BL/6マウスは、一般的に他の株とは異なるストレスに応答する。 あるsubstrainの違いは、これらとともに、定義されています。
BALB/cや129S6/Svなどのストレスを起こしやすい株とは対照的に、C57BL/6はストレス要因に応答する行動障害よりも代謝性が高い。,
ジェンダーと概日リズムは、社会化やその他の環境への影響に加えて、重要な要因である可能性があります。 C57bl/6マウスのために検証された慢性ストレスプロトコルが公開されています6。

  • Q:C57BL/6マウスに移植された腫瘍の増殖には、どのような要因が変動性を引き起こしますか?

PD:移植された腫瘍の増殖に影響を及ぼし得る多くの因子がある。,
同じ数の細胞が移植されても(そして同じレベルの生存率を有する)、移植片の正確な配置およびその後の灌流は、腫瘍増殖速度に大きな影響を及ぼ 例えば、腫瘍増殖速度は、それがより前方または後方に移植されるかどうかに応じて四つの因子によって変化することができる7。
皮下移植片の正確な配置は、研究において考慮され、制御されるべきである。 動物の年齢および開始重量はまた腫瘍の成長に影響を与えることができる—私はこれを正常化するために重量によってマウスを発注することを, 研究者はもマウスから単一ロケーションの影響から大阪大学総長平野俊夫から。
最後に、マウスは社会的に階層的であり、従属個体は免疫応答および腫瘍増殖に影響を与える可能性のある異なるレベルのストレスを有するこ 環境の豊かさ、および適切な順化および飼育条件(取り扱い、光、騒音など))男性の圧力を、特に最小にするのを助けることができます。,

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  • 防災対策:凍結保存する行を選択する際に考慮すべき選択肢と要素

1. ファルカスAM、パネアC、後藤Y、中戸G、ギャランディエスM、成島S、ホンダK、イワノフII。, マウス腸におけるセグメント化された糸状細菌によるTh17細胞の誘導。 ジャイアンツ所属。 2015年4月21日、104-11.
3. マハジャンVS、Demissie E、Mattoo H、Viswanadham V、Varki A、Morris R、Pillai S.遺伝子標的マウスにおける印象的な免疫表現型は、市販のC57BL/6株に由来するコピー番号変異体によって駆動さ 2016年(平成31年)15月9日(1901年9月)に廃止された。
6. モンテイロS、ロケS、デサ-カルサーダD、スーサN、コレイア-ネベスM、セルケイラJJ。 C57bl/6マウスにおけるストレス関連応答を誘導するための効率的な慢性予測不可能なストレスプロトコル。, フロント精神医学。 2015年2月、6月6日にメジャーデビュー。
7. アウエルバッハR、モリッシー LW、シドキー-ヤー。 皮内または皮下接種後のマウス腫瘍の発生率および増殖における地域的差異。 Cancer Res.1978Jun;38(6):1739-44.

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