Biologia Filmy edukacyjne
Ostatnia aktualizacja 4 lutego 2021 roku przez Sagar Aryal
wprowadzenie agaru z solą Mannitolową (MSA)
agar solny mannitolu (MSA) jest stosowany jako środek selektywny i różnicowy do izolacji i identyfikacji Staphylococcus aureus z próbek klinicznych i nieklinicznych., Jest zalecany do wykrywania i oznaczania gronkowców koagulazo-dodatnich w mleku, żywności i innych próbkach i zachęca do wzrostu grupy pewnych bakterii, hamując przy tym wzrost innych.
zasada agaru soli mannitolu (MSA)
Agar soli mannitolu zawiera ekstrakt z wołowiny i pepton proteozowy, co sprawia, że jest bardzo pożywny, ponieważ dostarcza niezbędnych czynników wzrostu i śladowych składników odżywczych, takich jak azot, witaminy, minerały i aminokwasy niezbędne do wzrostu. Nośnik zawiera 7.,5% stężenia chlorku sodu, co powoduje częściowe lub całkowite zahamowanie bakterii innych niż gronkowce. Mannitol jest fermentowalnym źródłem węglowodanów, którego fermentacja prowadzi do produkcji kwasu. Staphylococcus aureus rośnie na tym podłożu i fermentuje mannitol, tworząc żółte kolonie. Większość koagulazo-ujemnych gatunków gronkowców i Mikrokoków nie fermentuje mannitolu i rośnie jako małe czerwone kolonie. Kolor Kolonii i pożywki wynika z reaktywności Czerwieni fenolowej (wskaźnika) do pH pożywki. Czerwień fenolowa jest czerwona przy pH 8.,4 i czerwień fenolowa jest żółta przy pH 6,8. Agar jest środkiem krzepnącym. Ponadto do pożywki można dodać emulsję 5% v/v żółtka jaja, która umożliwia wykrycie aktywności lipazy gronkowców wraz z fermentacją mannitolu. Sól oczyszcza emulsję żółtka jaja, a produkcja lipazy jest wykrywana jako żółta nieprzezroczysta strefa wokół Kolonii.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
| Ingredients |
Gms/Litre |
| Proteose peptone |
10.0 |
| Sodium chloride |
75.0 |
| D- mannitol |
10.,0 |
| Beef extract |
1.0 |
| Phenol red |
0.025 |
| Agar |
15.0 |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.
Preparation of Mannitol Salt Agar (MSA)
- Suspend 111 grams of Mannitol Salt Agar in 1000 ml of distilled water.
- Boil to dissolve the medium completely.,
- sterylizować w autoklawie przy wadze 15 funtów. ciśnienie (121°C) przez 15 minut.
- w razie potrzeby sterylną emulsję z żółtka jaja (E7899) można dodać do końcowego stężenia 5% v/v po sterylizacji w autoklawie.
- do sterylnych szalek Petriego wlać schłodzony Agar z solą Mannitol i pozostawić do schłodzenia do temperatury pokojowej.,w zone
| Staphylococcus epidermidis |
Pink or Red colonies |
| Micrococci |
Red colonies |
| Escherichia coli |
No growth |
Uses of Mannitol Salt Agar (MSA)
- It is used for the selective isolation and differentiation of Staphylococcus aureus from clinical samples.,
- jest również stosowany do oznaczania gronkowców w żywności i produktach mlecznych.
- pożywka ta znajduje się również w bakteriologicznym podręczniku analitycznym do badań kosmetycznych.
- jest również stosowany w badaniu bakteriologicznym wody basenowej, uzdrowisk i wody pitnej za pomocą filtracji membranowej.
ograniczenia agaru solnego mannitolu (MSA)
- kilka gatunków gronkowców innych niż aureus jest dodatnich dla mannitolu i wytwarza żółte kolonie otoczone żółtymi strefami na tym podłożu (np., capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans i inne gatunki). W związku z tym dalsze badania biochemiczne są niezbędne do identyfikacji S. aureus lub innych gatunków.
- większość organizmów innych niż gronkowce jest hamowana przez wysokie stężenie soli w agarze solnym mannitolu, z wyjątkiem niektórych halofilnych organizmów morskich.
- kilka szczepów Staphylococcus aureus może wykazywać opóźnioną fermentację mannitolu. Płytki ujemne należy ponownie inkubować na noc przed wyrzuceniem.
- przypuszczalny Staphylococcus aureus musi być potwierdzony testem koagulazy.,